日粮添加谷氨酰胺对黔东南小香鸡免疫器官指数及肠道免疫的影响
Effects of Glutamine Supplementation on the Immune Organ Indexes and Intestinal Immunity of Qiandongnan Xiaoxiang Chickens
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Keywords:
- glutamine /
- Qiandongnan Xiaoxiang chicken /
- immune organ index /
- intestinal immuninty
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黔东南小香鸡是贵州省黔东南州极具地方特色的小型兼用型鸡品种，以“小、香、土”著称，具有体型娇小、结构匀称、耐粗饲和适应能力强等特点[1]。但在实际配制饲料过程中，没有针对黔东南小香鸡的特有日粮配制标准，加上传统粗放式的养殖方式，使得鸡群营养物质摄入不均衡[2]。而营养因素又是影响肠道健康的重要因素之一[3]。肠道既是消化吸收营养物质的重要场所，又是机体最大的免疫器官[4-5]。肠道内复杂的黏膜组织构成的生物屏障能有效防止有害物质进入血液循环及其他组织器官，维持肠道稳态及生理功能[6]。肠道屏障失调会限制营养供给，降低饲料转化率，影响家禽健康，增加养殖成本[3]。因此，维持家禽肠道健康是保证机体生长发育的重要途径。
谷氨酰胺(glutamine, Gln)是机体内含量丰富的游离氨基酸，是蛋白质合成的重要组成部分，是核酸、氨基酸、嘌呤和嘧啶等物质合成的主要合成前体[7]。谷氨酰胺作为肠细胞和淋巴细胞等快速分化细胞生长代谢的主要能源，在调节肠道相关免疫反应、黏蛋白合成、免疫球蛋白分泌及维持肠道免疫功能等方面发挥重要作用[8-9]。众多研究发现：日粮中添加1.0% Gln可提高肠绒毛高度，降低隐窝深度，增加肠道单位质量，降低肠道黏膜通透性，防止菌群移位，进而改善小肠肠道发育，维持肠黏膜屏障的完整[9-12]。国内外学者对Gln的研究已经取得众多成果，但关于Gln在中国地方鸡肠道免疫机能方面的研究鲜有报道。因此，本试验拟以贵州省优良品种黔东南小香鸡为研究对象，在其日粮中添加1.0% Gln，探究Gln对肉鸡免疫器官发育及肠道免疫的影响，以期为黔东南小香鸡早期日粮配制及地方特色鸡品种开发利用提供参考。
1. 材料与方法
1.1 试验设计
采用单因素试验设计，将90羽体质量相近、健康状况良好的1日龄小香鸡随机分为3组，每组5个重复，每个重复6羽。对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮的基础上分别添加0.5% 和1.0%的Gln。试验在贵州省榕江山农发展有限责任公司进行，鸡只饲养及免疫按照常规方案进行，每天投料3次，自由采食和饮水；保持鸡舍清洁干燥、温度及湿度适宜，试验期为42 d。日粮配制参照中国鸡饲养标准(2004)进行，试验日粮组成及营养水平见表1。
表 1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)Table 1. The ingredients and nutrient level of the basal diet (air-dry basis)原料 ingredients 含量/% content 玉米 corn 56.30 小麦麸 wheat bran 2.94 玉米蛋白粉 corn gluten meal 6.33 大豆粕 soybean meal 18.52 菜籽粕 rapeseed meal 10.00 石粉 limestone 1.18 食盐 NaCl 0.15 碳酸氢钙 calcium bicarbonate 1.89 植酸酶 phytase 0.04 氯化胆碱 choline chloride 0.15 蛋氨酸 methionine 0.15 赖氨酸 lysine 0.22 大豆油 soybean oil 1.63 预混料 premix 1) 0.50 合计 total 100.00 营养组成 nutrient composition2) 水平 level 粗蛋白质 crude protein 21.18 代谢能/(MJ·kg−1)metabolism energy 12.12 钙 calcium 1.00 有效磷 available phosphorus 0.45 蛋氨酸+胱氨酸 Met+Cys 0.90 赖氨酸 Lys 1.06 苏氨酸 Thr 0.79 注：1)预混料每千克饲粮提供：维生素A 6 000 IU、硫胺素 2.0 mg、核黄素 4.0 mg、烟酸 42 mg、吡哆醇 4.0 mg、维生素B12 0.01 mg、维生素D3 2 000 IU、维生素E 30 IU、维生素K3 1.8 mg、泛酸钙10.0 mg、生物素0.15 mg、叶酸 0.85 mg、铁 (以硫酸亚铁计) 80 mg、铜(以硫酸铜计) 8.0 mg、锰 (以硫酸锰计) 80 mg、锌(以硫酸锌计) 65 mg、碘(以碘化钾计) 0.50mg、硒(以亚硒酸钠计) 0.25 mg。2)粗蛋白为实测值，其余为计算值。
Note: 1) The premix provided the following per kg of diets：VA 6 000 IU, thiamin 2.0 mg, riboflavin 4.0 mg, nicotinamide 42 mg, pyridoxine-HCl 4.0 mg, VB12 0.01 mg, VD3 2 000 IU, VE 30 IU, VK3 1.8 mg, calcium pantothenate 10.0 mg, biotin 0.15 mg, folic acid 0.85 mg, Fe (as ferrous sulfate) 80 mg, Cu (as copper sulfate) 8.0 mg, Mn (as manganese sulfate) 80 mg, Zn (as zinc sulfate) 65 mg, I (as potassium iodide) 0.50mg, Se (as sodium selenite) 0.25 mg.2) Crude protein was a measured value, while the others were calculated values.1.2 主要试剂与仪器
1.2.1 主要试剂
试验所需的基础日粮由遵义金鼎农业科技有限公司配制；Gln购自上海斐雅科技发展有限公司，含量99.10%；Trizol (No.9108，TaKaRa)；TB Green Premix Ex Taq试剂盒 (No.RR420A，TaKaRa)。
1.2.2 主要仪器
分析天平(FR 224CN，深圳市科力易翔仪器设备有限公司)；BBS-SDC型超净工作台(济南鑫贝西生物技术有限公司)；旋涡混匀器(VELPZX3，东南科仪)；4 ℃离心机(Sigma-16KL，美国)；S1010E-微型离心机(山东博科科学仪器有限公司)；梯度PCR仪(Eppendorf，美国)；分光光度计(上海元析仪器有限责任公司)；UVS-99型微量核蛋白测试仪(上海创萌生物科技有限公司)；水平电泳仪(Bio-Rad)；凝胶成像系统(Bio-Rad)；荧光定量PCR仪(Bio-Rad，美国)。
1.3 测定指标及方法
1.3.1 血清免疫球蛋白测定
于试验结束当天，每组选取10羽称体质量(每个重复2羽)，用Eppendorf管进行颈静脉采血，并在4 ℃ 3 000 g离心力条件下，离心15 min，收集上清液−20 ℃保存，用于后续测定。血清IgA、IgG及IgM的测定按照试剂盒相关步骤进行。
1.3.2 免疫器官指数测定
鸡采血后立即屠宰并分离脾脏、法氏囊及胸腺，进行鲜质量记录，以获得免疫器官指数。
免疫器官指数=器官质量(g)/活体质量(kg)×100%。
1.3.3 空肠黏膜分泌型免疫球蛋白A (secretory immunoglobulin A, sIgA)含量测定
截取空肠并用预冷磷酸盐缓冲液食糜，刮取肠黏膜，−80 ℃保存。用于分泌型免疫球蛋白A (sIgA)含量的测定。按照试剂盒操作说明进行检测。
1.3.4 空肠组织RNA提取及黏蛋白mRNA表达量测定
截取空肠，用预冷的磷酸盐缓冲液冲洗食糜，用载玻片刮取肠道黏膜至2 mL冻存管中，迅速置于液氮保存，之后放于−80 ℃保存，用于测定空肠黏膜黏蛋白MUC1、MUC2的相对表达量。根据NCBI公布的基因序列设计目的基因的序列并以β-actin作内参，由生工生物合成，内参及目的基因序列见表2。
表 2 引物序列及参数Table 2. Primer sequences and parameters基因 genes 引物序列 (5′→3′) primers sequences 登录号 accession No. 产物大小/bp product size β-actin F：ATTGTCCACCGCAAATGCTTC
R：AAATAAAGCCATGCCAATCTCGTCNM_205518.1 113 MUC1 F：ACGCCTTCTTCAGCAGCAACTC
R：AGCAGCAGATGTGAGCAGTGATGXM_015279045.2 183 MUC2 F：CTGCTGTGCTCCACCATTAAGTCC
R：GCTTGACACGCTCGGAGTATAACGXM_001234581.3 127 空肠黏膜组织总RNA提取、质量浓度检测及品质检测依据说明书进行，之后进行反转录，用于黏蛋白基因MUC1及MUC2 mRNA相对表达量测定。按照试剂盒操作说明进行RT-PCR反应，反应体系(20 μL)为：SYBR Premix Ex Taq (2×) 10 μL，ROX Reference Dye Ⅱ (50×) 0.4 μL，cDNA 2.0 μL，上下游引物分别0.4 μL。反应程序为：95 ℃ 30 s (1个循环)，95 ℃ 5 s (40个循环)和60 ℃ 34 s (1个循环)。以β-actin作为内参采用2－ΔΔCt法计算目的基因的相对表达量。
1.4 数据统计
试验数据采用SAS 7.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)和均值的Duncan’s多重比较。试验结果用“mean±SD”表示。P>0.05表示差异不显著，P<0.05表示差异显著。
2. 结果与分析
2.1 Gln对黔东南小香鸡免疫器官发育的影响
由表3可知：黔东南小香鸡的免疫器官指数随着Gln添加量的增加而升高。与对照组相比，添加0.5% Gln显著增加了脾脏指数(P<0.05)，但对法氏囊指数及胸腺指数没有显著影响(P>0.05)；而添加1.0% Gln显著提高了脾脏指数、法氏囊指数及胸腺指数(P<0.05)，分别比对照组提高了16.13%、17.78%和14.78%。与0.5% Gln相比，添加1.0% Gln显著增加了脾脏指数(P<0.05)，但对法氏囊指数和胸腺指数没有显著影响(P>0.05)。
表 3 Gln对黔东南小香鸡免疫器官指数的影响Table 3. Effect of glutamine supplementation on the immune organ indexes of Qiandongnan Xiaoxiang chickens免疫器官
指数
immune organ indexes组别 groups P 值
P valueCK 0.5% Gln 1.0% Gln 法氏囊指数 bursa index 3.15±0.48 a 3.34±0.35 ab 3.71±0.19 b 0.018 脾脏指数 spleen index 2.17±0.10 a 2.34±0.12 b 2.52±0.17 c <0.001 胸腺指数 thymus index 7.51±0.77 a 8.12±0.55 ab 8.62±0.55 b 0.007 注：同行字母不同者表示差异显著(P<0.05)；CK组饲喂基础日粮；0.5% Gln组和1.0% Gln组分别在基础日粮中添加0.5%和1.0%的Gln；下同。
Note: In the same row, the values with different small letters mean significant difference (P<0.05); CK group was fed on the basal diet; 0.5% Gln group and 1.0% Gln group were respectively supplemented with 0.5% Gln and 1.0% Gln in the basal diet; the same as below.2.2 Gln对黔东南小香鸡血清免疫球蛋白含量的影响
由表4可知：黔东南小香鸡的血清IgG、IgM、IgA含量随着Gln添加量的增加而升高。与对照组相比，添加0.5% Gln对血清IgG、IgM及IgA含量没有显著影响(P>0.05)；而添加1.0% Gln显著增加了血清IgG、IgM及IgA的含量(P<0.05)，分别比对照组提高了21.21%、1.79%和30.93%。与0.5% Gln相比，添加1.0% Gln显著增加了IgA含量(P<0.05)，但对IgG和IgM没有显著影响(P>0.05)。
表 4 Gln对黔东南小香鸡血清免疫球蛋白含量的影响Table 4. Effect of glutamine supplementation on the serumimmunoglobulin content of Qiandongnan Xiaoxiang chickensng/L 血清免疫球蛋白
serumimmunog-
lobulin组别 groups P 值
P valueCK 0.5% Gln 1.0% Gln 免疫球蛋白 G
immunoglobulin G0.99±0.06 a 1.10±0.16 ab 1.20±0.11 b 0.054 免疫球蛋白 M
immunoglobulin M10.60±0.06 a 10.69±0.16 ab 10.79±0.11 b 0.067 免疫球蛋白 A
immunoglobulin A0.97±0.06 a 1.07±0.16 a 1.27±0.11 b 0.005 2.3 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜sIgA含量的影响
由图1可见：黔东南小香鸡空肠黏膜sIgA含量随着Gln添加量的增加而升高。与对照组相比，0.5% Gln添加对空肠黏膜sIgA含量无显著影响(P>0.05)，而添加1.0% Gln可显著提高空肠黏膜sIgA含量(P<0.05)。与0.5% Gln相比，添加1.0% Gln可显著提高空肠黏膜sIgA含量(P<0.05)。
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图 1 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜sIgA含量的影响注：柱状图上不同小写字母表示差异显著(P<0.05)；CK饲喂基础日粮；0.5% Gln组和1.0% Gln组分别在基础日粮中添加0.5%和1.0%的Gln；下同。Figure 1. Effect of glutamine supplementation on the content of sIgA in jejunal mucosa of Qiandongnan Xiaoxiang chickensNote: Values with different letters mean significant difference (P<0.05); CK group was fed on the basal diet; 0.5% Gln group and 1.0% Gln group were respectively supplemented with 0.5% Gln and 1.0% Gln in the basal diet; the same as below.2.4 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA相对表达量的影响
由图2可知：黔东南小香鸡空肠黏膜MUC1、MUC2 mRNA相对表达量随着Gln添加量的增加而升高。与对照组相比，添加0.5% Gln对空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA的相对表达量无显著影响(P>0.05)，但添加1.0% Gln可显著提高空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA的相对表达量(P<0.05)。与0.5% Gln相比，添加1.0% Gln可显著提高空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA的相对表达量(P<0.05)。
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图 2 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA相对表达量的影响Figure 2. Effects of glutamine supplementation on the mRNA expression level of MUC1 and MUC2 in jejunum mucosa of Qiandongnan Xiaoxiang chickens3. 讨论
3.1 Gln对黔东南小香鸡免疫器官发育的影响
免疫器官指数是衡量动物免疫器官发育状况、体质量变化进而间接反映动物应对外界应激能力的重要指标[13]。在免疫反应中T淋巴细胞与B淋巴细胞起着重要作用，而脾脏、法氏囊及胸腺是两种淋巴细胞形成和分化的重要场所[14]。Gln是肠细胞和淋巴细胞等快速分化细胞的主要供能物质，因此在日粮中添加Gln可促进机体免疫器官的发育，增强机体免疫能力[8]。周联高等[14]研究表明：日粮中添加Gln可明显提高21、42日龄肉鸡的脾脏指数和胸腺指数。陈祥等[15]发现：饲粮中添加Gln能促进42日龄肉鸭免疫器官发育，显著提高法氏囊、胸腺和脾脏指数。本研究显示：日粮中添加0.5% Gln显著增加了脾脏指数，但对法氏囊指数及胸腺指数没有显著影响。产生此结果可能与Gln添加量或Gln稳定性有关。研究表明：Gln在贮藏时不稳定，并对酸性环境敏感[16]。添加1.0% Gln可显著提高脾脏指数、法氏囊指数及胸腺指数。这与BARTELL等[12]和王中华等[17]报道的结果一致。以上研究表明：Gln有促进免疫器官发育，增强机体免疫的功能，而1.0%的添加量比较适宜。但李虎等[18]研究表明：日粮中添加Gln对黄羽肉鸡免疫器官质量及指数没有显著影响。这与本试验结果不太一致，可能的原因是品种、饲养方式或试验处理不同引起。
3.2 Gln对黔东南小香鸡血清免疫球蛋白含量的影响
血清免疫球蛋白是由浆细胞产生的可直接参与机体免疫的具有抗体活性的蛋白质[19]。研究表明：IgM有营养免疫作用，当机体受到外界刺激会引起其含量的升高，抵制抗原，缓解应激[20]。血清IgA具有抗菌和抗病毒等多种抗体活性，其含量仅次于IgG[21]，IgG是体内主要抗体之一，具有抗菌、中和病毒及免疫调节等作用[22]。本研究表明：血清IgG、IgM及IgA含量随着Gln添加量的增加而升高，但添加0.5% Gln对血清IgG、IgM及IgA含量没有显著影响。产生此结果的原因可能是Gln在组织或器官之间存在竞争。Gln进入体内，首先用于器官或组织生长，以至于释放至血液的Gln不足以促进免疫器官的分泌。研究表明：进入机体的Gln，2/3的碳在肠道部位被氧化为CO2[23]。随着Gln含量的增加，机体获得的Gln能同时满足生长和分泌的需要。因此，本试验添加的1.0% Gln显著增加了血清中IgG、IgM和IgA的含量，分别比对照组提高21.21%、1.79%和30.93%。有研究发现：饲料中添加Gln可增加血清IgA和IgM水平，提高机体免疫力[14, 24]，这与本试验结果一致。说明饲料中添加外源Gln可促进免疫球蛋白分泌，增强机体免疫功能。
3.3 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜sIgA含量的影响
肠道黏膜是机体抵抗病原体的第一道屏障，sIgA是由肠道黏膜浆细胞产生的一种分泌型免疫球蛋白，是黏膜免疫的基础[25]。sIgA具有防止病菌入侵、强化肠道屏障和减缓炎症反应的功能，是黏膜免疫过程中的主效应因子[26]。研究表明：大鼠在接受含有Gln的完全肠外营养(total parenteral nutrition, TPN)处理后，可显著提高胆汁中sIgA的含量，而Gln不足时，二者含量下降，表明Gln是sIgA合成分泌所必需，也是维持分泌型淋巴组织的必要成分[27-28]。本研究发现：日粮添加0.5% Gln对空肠sIgA含量无显著影响，而添加1.0% Gln可显著提高空肠sIgA含量。这表明空肠sIgA的分泌可能与Gln存在剂量关系。康磊等[29]研究表明：肠黏膜sIgA分泌随着Gln添加水平的提高而升高。本研究结果与其结果保持一致。研究表明：Gln可促进肠道黏膜分泌sIgA，Gln缺乏或不足时，sIgA含量随之下降，这可能与Gln调控可分泌sIgA浆细胞数量及其分泌功能有关[29]。研究表明：Gln是淋巴细胞和肠上皮细胞的“燃料”，可促进快速分化型细胞的成熟，增加浆细胞数量，提高肠黏膜中IgA含量，进而促进sIgA的合成与分泌[8-9, 29-30]。
3.4 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA相对表达量的影响
黏蛋白是由上皮细胞分泌的、分子质量较高的糖蛋白[31]，主要分布在胃肠道、呼吸道和生殖道等细胞分泌的粘液中。MUC1属于I型跨膜蛋白，常见于呼吸道、胃肠道及免疫相关细胞表面，对此类细胞上皮表面起保护和润滑作用[32-33]。MUC2是肠道黏膜层的主要成分，其在肠道表面形成黏膜层，对起着润滑肠道黏膜和拮抗致病菌侵袭的作用[34-35]。肠道内MUC1、MUC2 mRNA含量的异常表达，可反映细菌对肠上皮细胞侵染风险的大小，也可间接反映肠道内环境的稳定程度[36]。本研究发现：空肠黏膜黏蛋白mRNA的表达随Gln添加量的增加而提高，这表明Gln可促进黏蛋白分泌，维持肠道内环境稳定。研究表明：Gln可为蛋白质的快速周转提供原料[37]。添加1.0% Gln可显著提高空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA的表达量，这表明随着Gln添加水平的增加，两种黏蛋白分泌增强，肠道屏障功能进一步加强。然而，到目前为止，有关Gln对肉鸡肠道黏膜MUC1及MUC2表达的影响还未见报道。高玉琪等[38]研究显示：在日粮中添加不同比例Gln可显著提高试验后期(60 d)獭兔回肠MUC1 mRNA表达量。WANG等[39]研究表明：含有Gln的肠外营养可提高小鼠小肠MUC2 mRNA表达水平。这些结果提示：日粮添加Gln在一定程度上可促进肠上皮的分化与成熟，加快黏膜黏蛋白分泌，维持肠道结构与功能完整性，充分发挥黏膜的屏障功能[18]。
4. 结论
日粮添加1.0% Gln促进了黔东南小香鸡免疫器官发育，提高了血清IgA、IgG、IgM含量和空肠黏膜MUC1、MUC2 mRNA相对表达水平，增强了机体免疫机能。
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图 1 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜sIgA含量的影响
注：柱状图上不同小写字母表示差异显著(P<0.05)；CK饲喂基础日粮；0.5% Gln组和1.0% Gln组分别在基础日粮中添加0.5%和1.0%的Gln；下同。
Figure 1. Effect of glutamine supplementation on the content of sIgA in jejunal mucosa of Qiandongnan Xiaoxiang chickens
Note: Values with different letters mean significant difference (P<0.05); CK group was fed on the basal diet; 0.5% Gln group and 1.0% Gln group were respectively supplemented with 0.5% Gln and 1.0% Gln in the basal diet; the same as below.
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图 2 Gln对黔东南小香鸡空肠黏膜MUC1及MUC2 mRNA相对表达量的影响
Figure 2. Effects of glutamine supplementation on the mRNA expression level of MUC1 and MUC2 in jejunum mucosa of Qiandongnan Xiaoxiang chickens
表 1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)
Table 1 The ingredients and nutrient level of the basal diet (air-dry basis)
原料 ingredients 含量/% content 玉米 corn 56.30 小麦麸 wheat bran 2.94 玉米蛋白粉 corn gluten meal 6.33 大豆粕 soybean meal 18.52 菜籽粕 rapeseed meal 10.00 石粉 limestone 1.18 食盐 NaCl 0.15 碳酸氢钙 calcium bicarbonate 1.89 植酸酶 phytase 0.04 氯化胆碱 choline chloride 0.15 蛋氨酸 methionine 0.15 赖氨酸 lysine 0.22 大豆油 soybean oil 1.63 预混料 premix 1) 0.50 合计 total 100.00 营养组成 nutrient composition2) 水平 level 粗蛋白质 crude protein 21.18 代谢能/(MJ·kg−1)metabolism energy 12.12 钙 calcium 1.00 有效磷 available phosphorus 0.45 蛋氨酸+胱氨酸 Met+Cys 0.90 赖氨酸 Lys 1.06 苏氨酸 Thr 0.79 注：1)预混料每千克饲粮提供：维生素A 6 000 IU、硫胺素 2.0 mg、核黄素 4.0 mg、烟酸 42 mg、吡哆醇 4.0 mg、维生素B12 0.01 mg、维生素D3 2 000 IU、维生素E 30 IU、维生素K3 1.8 mg、泛酸钙10.0 mg、生物素0.15 mg、叶酸 0.85 mg、铁 (以硫酸亚铁计) 80 mg、铜(以硫酸铜计) 8.0 mg、锰 (以硫酸锰计) 80 mg、锌(以硫酸锌计) 65 mg、碘(以碘化钾计) 0.50mg、硒(以亚硒酸钠计) 0.25 mg。2)粗蛋白为实测值，其余为计算值。
Note: 1) The premix provided the following per kg of diets：VA 6 000 IU, thiamin 2.0 mg, riboflavin 4.0 mg, nicotinamide 42 mg, pyridoxine-HCl 4.0 mg, VB12 0.01 mg, VD3 2 000 IU, VE 30 IU, VK3 1.8 mg, calcium pantothenate 10.0 mg, biotin 0.15 mg, folic acid 0.85 mg, Fe (as ferrous sulfate) 80 mg, Cu (as copper sulfate) 8.0 mg, Mn (as manganese sulfate) 80 mg, Zn (as zinc sulfate) 65 mg, I (as potassium iodide) 0.50mg, Se (as sodium selenite) 0.25 mg.2) Crude protein was a measured value, while the others were calculated values.
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表 2 引物序列及参数
Table 2 Primer sequences and parameters
基因 genes 引物序列 (5′→3′) primers sequences 登录号 accession No. 产物大小/bp product size β-actin F：ATTGTCCACCGCAAATGCTTC
R：AAATAAAGCCATGCCAATCTCGTCNM_205518.1 113 MUC1 F：ACGCCTTCTTCAGCAGCAACTC
R：AGCAGCAGATGTGAGCAGTGATGXM_015279045.2 183 MUC2 F：CTGCTGTGCTCCACCATTAAGTCC
R：GCTTGACACGCTCGGAGTATAACGXM_001234581.3 127
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表 3 Gln对黔东南小香鸡免疫器官指数的影响
Table 3 Effect of glutamine supplementation on the immune organ indexes of Qiandongnan Xiaoxiang chickens
免疫器官
指数
immune organ indexes组别 groups P 值
P valueCK 0.5% Gln 1.0% Gln 法氏囊指数 bursa index 3.15±0.48 a 3.34±0.35 ab 3.71±0.19 b 0.018 脾脏指数 spleen index 2.17±0.10 a 2.34±0.12 b 2.52±0.17 c <0.001 胸腺指数 thymus index 7.51±0.77 a 8.12±0.55 ab 8.62±0.55 b 0.007 注：同行字母不同者表示差异显著(P<0.05)；CK组饲喂基础日粮；0.5% Gln组和1.0% Gln组分别在基础日粮中添加0.5%和1.0%的Gln；下同。
Note: In the same row, the values with different small letters mean significant difference (P<0.05); CK group was fed on the basal diet; 0.5% Gln group and 1.0% Gln group were respectively supplemented with 0.5% Gln and 1.0% Gln in the basal diet; the same as below.
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表 4 Gln对黔东南小香鸡血清免疫球蛋白含量的影响
Table 4 Effect of glutamine supplementation on the serumimmunoglobulin content of Qiandongnan Xiaoxiang chickens
ng/L 血清免疫球蛋白
serumimmunog-
lobulin组别 groups P 值
P valueCK 0.5% Gln 1.0% Gln 免疫球蛋白 G
immunoglobulin G0.99±0.06 a 1.10±0.16 ab 1.20±0.11 b 0.054 免疫球蛋白 M
immunoglobulin M10.60±0.06 a 10.69±0.16 ab 10.79±0.11 b 0.067 免疫球蛋白 A
immunoglobulin A0.97±0.06 a 1.07±0.16 a 1.27±0.11 b 0.005
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