低温贮藏对真空包装酸肉食用卫生及感官品质的影响及酸肉保质期预测
Effect of Cryopreservation on the Hygienic and Sensory Quality of Vacuum-packed Sour Pork and Prediction of the Shelf Life of Sour Pork
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Keywords:
- sour pork /
- vacuum packed /
- cryopreservation /
- quality change /
- shelf life prediction
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酸肉是一种极具地域民族特色的发酵肉制品，常见于中国西南傣、侗、苗和藏等少数民族地区，其味道鲜美、肥而不腻、酸味爽口，具有做法简单和保存期长等特点；按地域可将其分为湖南湘西传统酸肉、广西传统酸肉和渝黔传统酸肉[1-4]。本课题组已对渝黔地区传统酸肉微生物区系、基本营养品质和风味品质等做了较深入的研究[5-7]。在酸肉的发酵过程中，蛋白质及脂肪发生降解，乳酸、游离氨基酸和游离脂肪酸含量上升，加上微生物的酶解作用，赋予酸肉特有的风味[8-9]。目前对酸肉的研究主要涉及加工工艺、风味品质及变化、微生物多样性、功能特性及安全性等方面；有少量以发酵方式长期保藏酸肉蛋白质变化及对消化特性影响的报道[10]，但未见酸肉商品化贮藏的相关报道。
作为一种地方性特色风味传统美食，多以发酵的方式长期保藏。要拓展酸肉的消费地域和延长其产业链，其商品化保藏研究尤为重要。目前肉类保藏研究主要是基于温度和水分控制的保藏以及微生物抑制过程的保藏(杀菌和抑菌)，如电离辐射和包装等。国内外普遍采用的保藏方法有低温保藏，添加茶多酚、Nisin和壳聚糖等保鲜剂[11-14]以及采用气调或真空包装等[15-17]。肉类在低温下，自身的酶活性及化学反应速度下降，微生物生长代谢速度降低或部分被抑制，从而达到防腐保鲜目的。传统酸肉以发酵方式保藏，在酸和乳酸菌持续作用下，其蛋白质和脂肪持续降解，使酸肉风味品质呈现动态变化[7]。为此，本研究拟联合采用低温和真空包装技术[18]，分析酸肉在低温保藏过程中营养安全品质及感官品质特点，探索酸肉食品冷链运输过程中食用品质等的变化及保藏方法的可行性，为传统酸肉产品的工业化生产和商品化提供支持。
1. 材料与方法
1.1 试验材料
新鲜猪肉(里脊、肥肉)和湖北籼米购自重庆北碚天生永辉超市。籼米炒至微黄，粉碎后过40目筛。试验用三氯乙酸、石油醚(沸程30~60 ℃)、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、2-硫代巴比妥酸(TBA)、溴甲酚绿、邻苯二甲酸氢钾和异亮氨酸等均为分析纯。
1.2 试验方法
1.2.1 酸肉制备
将新鲜猪肉洗净控水，切成约3 cm×5 cm×0.5 cm薄片，按质量比添加5%食盐和10%米粉，拌和均匀，装坛，水密封，(20±2)℃发酵35 d，得酸肉成品，平均含水量43.76%。
1.2.2 试验设计
采用PA/PE共挤膜(双层24丝)真空包装(DZ600-2S真空包装机)酸肉。然后分别置于低温4 和−20 ℃贮藏，定期取样检测。总蛋白含量采用瘦肉分析，其他各指标采用肥瘦各半分析。
1.2.3 测定方法
蛋白质采用GB 5009.5—2016中的凯氏定氮法测定；脂肪采用GB 5009.6—2016中的索氏抽提法测定；游离脂肪酸按照SN/T 0801.19—1999的方法测定。
非蛋白氮(non-ptotein nitrogen, NPN)参照张平等[19]的方法，对样品进行前处理后采用凯氏定氮法测定。
挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen, TVB-N)采用GB 5 009.228—2016中的半微量定氮法测定，测定结果以GB 2 707—2016鲜(冻)畜禽产品中TVB-N限量标准(≤15 mg/100 g)、腌猪肉SB/T 10294—2012一级品标准限值(≤20 mg/100 g)和二级品标准限值(≤45 mg/100 g)为对照分析。
硫代巴比妥酸(thio barbituric acid, TBA)的测定参照黄卉等[20]的方法并略作修改，按下式计算：
$ {\rm TBA}=\frac{{A}_{532}-{A}_{600}}{155\times m}\times 72.6\times 100 $
式中，TBA值以每100 g样中丙二醛毫克数表示(mg/100 g)；m为样品质量，g；A532和A600分别为上清液在波长532和600 nm 处的吸光度；72.6为丙二醛摩尔质量，g/mol；155为摩尔吸光系数。计算结果与NAKYINSIGE等[21]报道的肉发出腐臭异味的TBA阈值(5 mg/kg)相比。
菌落总数参照GB 4789.2—2016中的PCA培养基倾注法计数，结果以CFU/g表示，以食品微生物规范国际委员会所规定的菌落总数可接受的最高范围7.0 lg (CFU/g)为标准。
色泽采用色差仪(美国HunterLab公司)测定。将酸肉表面的米粉擦净，色差仪使用前用白板校准，分别记录L*、a*和b*值为所测样品亮度值、红度值和黄度值，每个样品取不同肉块重复测定5次，取平均值。总色差ΔE按以下公式[22]计算：
$\Delta {{E}}={{\rm{[(}}\Delta {{L^*}}{{\rm{)}}^{\rm{2}}} + {{\rm{(}}\Delta a^*)^2} + {(\Delta b^*)^2}]^{\frac{1}{2}}}$
式中，ΔL=L*−L0，Δa=a*−a0，Δb=b*−b0；L*、a*和b*为不同贮藏阶段酸肉的亮度值、红度值和黄度值，L0、a0和b0为贮藏0 d酸肉的亮度值、红度值和黄度值。
1.2.4 感官评价
采用模糊数学综合评判法[23]，将各组酸肉蒸熟，挑选接受食品感官评价人员10人 (男女各半) 进行品评，以外观、色泽、气味和滋味为评定指标，评价标准与指标见表1。
表 1 感官评价标准表Table 1. Standard of sensory evaluation for sour pork指标 indicators 优级 optimal level 良好 good 一般 general 较差 poor 外观
appearance外观完好，无发黏和胀袋现象
good appearance, no stickyhair and bulging bags外观尚好，无发黏和胀袋现象
good appearance, no sticky hair and bulging bags外观尚好，轻微发黏
good appearance, slightly sticky外观不可接受，明显发黏和胀袋现象
appearance unacceptable, obvious sticky and bulging bags色泽
colour瘦肉红色，组织纹理紧致分明；肥肉粉白；米粉白色
lean meat red, texture tight andclear; fat white; rice white瘦肉暗红，组织纹理紧致；肥肉粉白色；米粉白色
lean meat dark red, texture tight; fat pink white; rice white瘦肉暗粉红，组织纹理略疏软；肥肉微见粉色；米粉微黄
lean meat dark pink, tissue texture slightly thin soft; fat slightly see pink; rice yellow瘦肉微发白，组织发糜松散；肥肉发黄；米粉变黄
thin meat slightly white, organization hair mi loose; fat turns yellow; rice yellow气味
flavor浓郁发酵肉香，无异味
rich fermented meat flavor, no peculiar smell发酵肉香，无异味
fermented meat fragrant,no odor发酵肉香，略有异味
the fermented meat is fragrantand slightly peculiar有酸败味，异味明显
there is a sour taste, odor obvious滋味
taste酸度适宜，咸甜鲜适口浓郁
good acidity, savory and sweet taste酸度适宜，口感较浓郁
the acidity is good and the taste is rich酸咸甜鲜适中，口感一般
sour, salty and sweet tastemoderate, general过酸，有哈喇味，口感不适
too sour, have rancid taste, taste bad按酸肉质量级别分为优级、良好、一般和较差，并分别赋予90、80、70和50分。再将综合评价结果集中各量分别乘以相应分值并进行加和计算，最终得到不同贮藏阶段酸肉感官评价总得分，<70分不能食用。
1.3 数据分析
结果以“mean±SD”表示，n=3；采用OriginPro 2018作图，SPSS 22.0进行数据分析，P<0.01表示极显著，P<0.05表示显著。
2. 结果与分析
2.1 蛋白质及其降解产物在贮藏中的变化
2.1.1 蛋白质含量在酸肉低温保藏中的变化
由图1可知：随贮藏时间延长，酸肉中总蛋白含量缓慢下降，至180 d时4和−20 ℃处理蛋白质含量分别为0 d时的85.92%和85.82%，表明采用真空包装后长时间低温冷藏和冻藏对酸肉蛋白质含量影响不大。蛋白质下降可能是在长时间贮藏过程中持续降解引起的，但低温抑制了微生物的生理活动，使蛋白质降解速度放慢，在一定程度上延长了酸肉的保质期。
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图 1 酸肉总蛋白（瘦）、NPN、TVB-N、脂肪、游离脂肪酸和TBA在低温贮藏中的含量（湿基）变化Figure 1. The content (wet base) changes of total protein, NPN, TVB-N, fat, total free fatty acids and TBA in sour pork during cryopreservation2.1.2 非蛋白氮(NPN)和挥发性盐基氮(TVB-N)在低温贮藏中的变化
由图1b可知：NPN含量随贮藏时间延长逐渐升高。贮藏至180 d时4和−20 ℃处理NPN含量分别为0 d时的1.59倍和1.91倍，蛋白质的持续降解会导致产品感官不可接受，失去食用价值，为此，检测TVB-N在酸肉贮藏中的变化。图1c显示：酸肉中TVB-N含量随贮藏时间延长逐渐升高，至180 d时4和−20 ℃处理TVB-N含量分别为0 d时的3.08倍和2.81倍；与GB鲜(冻)畜禽产品中TVB-N限量标准相比，4和−20 ℃处理分别贮藏30和45 d时即超过限值；与腌猪肉一级品标准限值相比，分别在贮藏60和90 d超过限值；但贮藏至180 d时均未超过二级品标准限值。相关性分析表明：低温冷藏酸肉蛋白质含量与NPN、TVB-N变化均呈负相关(rNPN=−0.978，rTVB-N=−0.986，P<0.01)；低温冻藏酸肉蛋白质含量与NPN、TVB-N变化均呈负相关(rNPN=−0.974，rTVB-N=−0.944，P<0.01)，表明NPN和TVB-N含量随蛋白质降解显著升高。以SB/T 10294—2012一级品标准限值(≤20 mg/100 g)为参考，通过线性方程计算得到4 ℃组贮藏时间不宜超过57 d，−20 ℃组贮藏时间不宜超过75 d。
2.2 脂肪及降解产物在酸肉贮藏中的变化
2.2.1 脂肪含量在酸肉低温贮藏中的变化
由图1d可知：酸肉脂肪含量随贮藏时间延长略有下降。180 d时4和−20 ℃处理脂肪含量分别为0 d时的96.37%和97.07%，表明采用真空包装处理后长时间低温冷藏和冻藏对酸肉脂肪含量影响较小。
2.2.2 游离脂肪酸和TBA在低温贮藏中的变化
由图1e可知：4和−20 ℃处理游离脂肪酸总量均随贮藏时间延长逐渐升高(P<0.05)，至180 d时游离脂肪酸含量分别为0 d时的1.43倍和1.31倍，冻藏处理游离脂肪酸增幅略低于冷藏处理。同时，TBA值逐渐升高(P<0.05)，贮藏至180 d时，4和−20 ℃处理TBA值分别为0 d时的2.85倍和3.42倍(图1f)。与肉发出腐臭异味的TBA阈值相比，4 ℃贮藏时间不宜超过48 d，−20 ℃不宜超过74 d。
2.3 酸肉低温贮藏时菌落总数的变化
由图2可知：酸肉菌落总数随贮藏时间的延长而增加，在检测时间段，冷藏组菌落总数是冻藏组的1.64~1.98倍；冻藏组菌落总数在贮藏中保持平稳较低的水平，表明冻藏可有效抑制微生物生长繁殖。冷藏组在贮藏至150 d后菌落总数达到7.24 lg(CFU/g)，超出食品微生物规范国际委员会所规定的菌落总数可接受的最高范围，此时也观察到胀袋现象。
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图 2 酸肉菌落总数在低温贮藏中的变化Figure 2. The change of total bacterial colonies in sour pork in cryopreservation2.4 酸肉色泽在低温贮藏中的变化
如表2所示：冻藏组中，随贮藏时间延长，瘦肉L*值略微上升后趋于平稳，肥肉L*值明显高于瘦肉且一直处于较高水平，说明在冻藏过程中酸肉色泽逐渐变淡后保持稳定；冷藏组中，贮藏90 d后，肥肉L*值显著高于瘦肉，但瘦肉L*值在冷藏过程中呈现略增高后下降再升高的趋势，说明冷藏酸肉在贮藏过程中颜色有略微变深的现象。
表 2 酸肉色泽的变化Table 2. The change of color of sour pork储藏温度/℃
storage temperature贮藏时间/d
storage time酸肉(瘦) sour pork (lean) 酸肉(肥) sour pork (fat) L* a* b* ΔE L* a* b* ΔE 4 0 48.64±1.00 bc 3.15±0.50 a 10.85±0.31 a — 73.48±0.25 a −0.95±0.11 ab 6.43±0.38 c — 30 46.77±0.98 cd 2.32±0.88 ab 9.51±0.54 a 2.66±0.63 c 71.63±0.73 b −0.97±0.25 ab 6.21±0.40 c 1.97±0.59 c 60 51.04±0.52 ab 2.13±0.96 ab 11.07±0.55 a 4.70±0.20 b 72.12±0.34 b −1.26±0.13 b 7.85±0.51 b 2.03±0.49 c 90 48.07±0.57 cd 1.73±0.15 b 10.63±0.55 a 4.28±0.41 b 68.33±0.48 e −1.02±0.23 ab 8.44±0.41 ab 3.90±0.60 b 120 45.25±0.47 d 1.62±0.22 b 9.60±0.64 a 5.64±0.50 ab 68.85±0.35 de −0.73±0.26 a 8.71±0.56 ab 4.58±0.18 ab 150 52.54±0.62 a 1.64±0.44 b 10.22±0.48 a 5.16±0.49 b 69.43±0.32 d −0.98±0.07 ab 8.55±0.27 ab 5.55±0.46 a 180 52.19±0.29 a 1.46±0.29 b 9.10±0.24 a 6.62±0.85 a 70.53±0.69 c −1.22±0.10 b 8.94±0.21 a 5.21±0.10 a −20 0 47.09±0.60 d 3.20±0.21 c 8.49±0.42 de — 69.81±0.45 c −0.53±0.13 b 7.40±0.15 d — 30 49.16±0.48 c 4.42±0.76 b 7.76±0.59 e 2.81±0.50 b 70.48±0.36 bc −0.50±0.09 b 9.00±0.18 ab 1.37±0.39 b 60 51.97±0.41 ab 5.47±0.27 a 10.16±0.26 c 2.87±0.21 b 71.04±0.29 b −0.55±0.12 b 9.64±0.21 a 1.54±0.42 b 90 51.86±0.66 ab 1.46±0.31 d 9.13±0.32 d 2.83±0.09 b 72.08±0.18 a −0.22±0.07 a 8.15±0.60 c 1.19±0.51 b 120 50.88±0.13 b 1.82±0.22 d 10.89±0.10 bc 4.01±0.31 a 70.98±0.51 b −0.37±0.05 ab 7.40±0.15 d 1.75±0.31 ab 150 52.46±1.03 a 1.25±0.12 d 11.74±0.50 ab 4.29±0.62 a 70.00±0.54 bc −0.53±0.13 b 8.61±0.46 bc 2.58±0.06 a 180 46.09±0.42 d 1.34±0.27 d 12.17±0.45 a 4.40±0.35 a 70.53±0.66 bc −0.44±0.06 ab 8.64±0.21 bc 2.49±0.15 a 注：不同小写字母表示差异显著(P <0.05)。
Note: Different lowercase letters indicate significant difference (P <0.05).冻藏组中，瘦肉a*值在前期明显上升后骤降到较低水平，而肥肉a*值则保持在相对较低水平，说明酸肉在冻藏过程中瘦肉的红度值由高变低；冷藏组中，瘦肉a*值呈明显下降的趋势，但远远高于肥肉的a*值，说明酸肉的红度值主要由瘦肉提供，且在贮藏过程中冻藏组的红度值整体上始终高于冷藏组。
冻藏组中，瘦肉的b*值前期变化不显著，整体呈上升的趋势，略高于肥肉，说明酸肉在冻藏过程中肉色开始缓慢变黄变白，感官品质因此也逐渐下降。冷藏组瘦肉的b*值前期呈上升趋势后缓慢下降并趋于平稳，肥肉的b*值则总体呈缓慢上升趋势，但变化幅度不大，说明冷藏酸肉的变黄程度较冻藏略严重。
由表2还可知：总色差ΔE随贮藏时间延长逐渐增大，且冷藏处理组肥肉和瘦肉ΔE均整体表现为高于冻藏处理组，显著性分析表明冻藏处理组酸肉的色变较小。
2.5 低温贮藏酸肉的感官评价
由图3可知：酸肉感官评分在贮藏前期保持稳定后随贮藏时间延长逐渐下降。低温冷藏处理在贮藏120 d内感官评分在80.50~88.10之间，属于良好；150 d时感官评分74.00，属于可接受范围；180 d时样品已经不能接受，可能与长时间冷藏酸肉蛋白质和脂肪的缓慢降解有关。通过线性分析，低温冷藏在95 d内感官评分高于80，食用品质较好。低温冻藏处理感官评分在150 d内属于良好，贮藏180 d时感官评分为78.40，仍属可接受范围。结果表明：采用真空包装后低温保藏能够较好地保持酸肉的食用品质。
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图 3 低温贮藏酸肉模糊数学感官评分Figure 3. Sensory evaluation of fuzzy mathematical sensory evaluation of sour pork stored in cryopreservation3. 讨论
目前对酸肉的研究主要针对其工艺及风味变化，对其商业化保藏及贮藏程中的品质变化鲜有报道。本研究发现：真空包装酸肉在低温贮藏过程中蛋白质降解产物NPN含量及TVB-N含量逐渐升高，NPN含量变化趋势与GIOVANNA等[24]报道的发酵香肠中蛋白质降解相似，与TOLDRÁ[25]研究的干腌肉制品中蛋白质水解变化趋势类似。但蛋白质的持续降解会导致低分子量的含氮化合物生成，引发苦味、金属味甚至酸败味的产生，严重影响食品风味，最终导致产品感官不可接受，失去食用价值[26]。因此，传统的发酵保藏不能满足商业化酸肉的贮藏需求，而真空包装联合低温贮藏能有效延缓蛋白质和脂肪的降解，延长酸肉保质期。
色泽是食品感官品质重要构成，丁武等[27]报道L*值与原料肉存放时间显著相关，a*值与原料肉新鲜度存在显著关系。酸肉在冷藏过程中瘦肉的红度值由高变低，可能与可溶性肌红蛋白含量的降低和脂质的氧化有关[28]；冻藏过程中，瘦肉a*值呈明显下降趋势，但远远高于肥肉a*值，可能原因是较高的温度在一定程度上可以提高高铁肌红蛋白的形成速率，使酸肉呈现较高的红度值[29]。许多研究也表明：贮藏温度对肉色有一定的影响。LI等[30]研究发现：温度越低，肉在贮藏过程中的颜色就越稳定，低温能有效抑制高铁肌红蛋白的积累；尚坤等[31]研究发现：鸡肉冻藏温度越高，L*值越大，a*值下降越快，可能是低温抑制了肌红蛋白的氧化。
本研究表明：真空包装低温贮藏能延缓酸肉蛋白质和脂肪的降解，减少其在贮藏过程中降解产物的生成，能很好地抑制微生物生长，减少酸肉贮藏过程中色泽的变化。以腌猪肉一级品标准限值TVB-N含量为参考，4 ℃贮藏不宜超过57 d，−20 ℃贮藏不宜超过75 d；以肉发出腐臭异味的TBA阈值为参考，4 ℃贮藏不宜超过48 d，−20 ℃贮藏不宜超过74 d；以ICMSF规定菌落总数为标准，4 ℃贮藏不宜超过150 d，而冻藏组菌落总数在本试验时间段内处于较低水平。色差分析显示：冻藏组优于冷藏组。模糊数学感官评判显示4 ℃贮藏不宜超过95 d，−20 ℃贮藏180 d内均可接受。综上所述，真空包装酸肉采用低温冷藏和冻藏的适宜贮藏时间分别为48和74 d，冻藏优于冷藏。本研究可为西南地区传统酸肉商品化冷链保藏提供适宜货架期参考。
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图 1 酸肉总蛋白（瘦）、NPN、TVB-N、脂肪、游离脂肪酸和TBA在低温贮藏中的含量（湿基）变化
Figure 1. The content (wet base) changes of total protein, NPN, TVB-N, fat, total free fatty acids and TBA in sour pork during cryopreservation
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图 2 酸肉菌落总数在低温贮藏中的变化
Figure 2. The change of total bacterial colonies in sour pork in cryopreservation
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图 3 低温贮藏酸肉模糊数学感官评分
Figure 3. Sensory evaluation of fuzzy mathematical sensory evaluation of sour pork stored in cryopreservation
表 1 感官评价标准表
Table 1 Standard of sensory evaluation for sour pork
指标 indicators 优级 optimal level 良好 good 一般 general 较差 poor 外观
appearance外观完好，无发黏和胀袋现象
good appearance, no stickyhair and bulging bags外观尚好，无发黏和胀袋现象
good appearance, no sticky hair and bulging bags外观尚好，轻微发黏
good appearance, slightly sticky外观不可接受，明显发黏和胀袋现象
appearance unacceptable, obvious sticky and bulging bags色泽
colour瘦肉红色，组织纹理紧致分明；肥肉粉白；米粉白色
lean meat red, texture tight andclear; fat white; rice white瘦肉暗红，组织纹理紧致；肥肉粉白色；米粉白色
lean meat dark red, texture tight; fat pink white; rice white瘦肉暗粉红，组织纹理略疏软；肥肉微见粉色；米粉微黄
lean meat dark pink, tissue texture slightly thin soft; fat slightly see pink; rice yellow瘦肉微发白，组织发糜松散；肥肉发黄；米粉变黄
thin meat slightly white, organization hair mi loose; fat turns yellow; rice yellow气味
flavor浓郁发酵肉香，无异味
rich fermented meat flavor, no peculiar smell发酵肉香，无异味
fermented meat fragrant,no odor发酵肉香，略有异味
the fermented meat is fragrantand slightly peculiar有酸败味，异味明显
there is a sour taste, odor obvious滋味
taste酸度适宜，咸甜鲜适口浓郁
good acidity, savory and sweet taste酸度适宜，口感较浓郁
the acidity is good and the taste is rich酸咸甜鲜适中，口感一般
sour, salty and sweet tastemoderate, general过酸，有哈喇味，口感不适
too sour, have rancid taste, taste bad
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表 2 酸肉色泽的变化
Table 2 The change of color of sour pork
储藏温度/℃
storage temperature贮藏时间/d
storage time酸肉(瘦) sour pork (lean) 酸肉(肥) sour pork (fat) L* a* b* ΔE L* a* b* ΔE 4 0 48.64±1.00 bc 3.15±0.50 a 10.85±0.31 a — 73.48±0.25 a −0.95±0.11 ab 6.43±0.38 c — 30 46.77±0.98 cd 2.32±0.88 ab 9.51±0.54 a 2.66±0.63 c 71.63±0.73 b −0.97±0.25 ab 6.21±0.40 c 1.97±0.59 c 60 51.04±0.52 ab 2.13±0.96 ab 11.07±0.55 a 4.70±0.20 b 72.12±0.34 b −1.26±0.13 b 7.85±0.51 b 2.03±0.49 c 90 48.07±0.57 cd 1.73±0.15 b 10.63±0.55 a 4.28±0.41 b 68.33±0.48 e −1.02±0.23 ab 8.44±0.41 ab 3.90±0.60 b 120 45.25±0.47 d 1.62±0.22 b 9.60±0.64 a 5.64±0.50 ab 68.85±0.35 de −0.73±0.26 a 8.71±0.56 ab 4.58±0.18 ab 150 52.54±0.62 a 1.64±0.44 b 10.22±0.48 a 5.16±0.49 b 69.43±0.32 d −0.98±0.07 ab 8.55±0.27 ab 5.55±0.46 a 180 52.19±0.29 a 1.46±0.29 b 9.10±0.24 a 6.62±0.85 a 70.53±0.69 c −1.22±0.10 b 8.94±0.21 a 5.21±0.10 a −20 0 47.09±0.60 d 3.20±0.21 c 8.49±0.42 de — 69.81±0.45 c −0.53±0.13 b 7.40±0.15 d — 30 49.16±0.48 c 4.42±0.76 b 7.76±0.59 e 2.81±0.50 b 70.48±0.36 bc −0.50±0.09 b 9.00±0.18 ab 1.37±0.39 b 60 51.97±0.41 ab 5.47±0.27 a 10.16±0.26 c 2.87±0.21 b 71.04±0.29 b −0.55±0.12 b 9.64±0.21 a 1.54±0.42 b 90 51.86±0.66 ab 1.46±0.31 d 9.13±0.32 d 2.83±0.09 b 72.08±0.18 a −0.22±0.07 a 8.15±0.60 c 1.19±0.51 b 120 50.88±0.13 b 1.82±0.22 d 10.89±0.10 bc 4.01±0.31 a 70.98±0.51 b −0.37±0.05 ab 7.40±0.15 d 1.75±0.31 ab 150 52.46±1.03 a 1.25±0.12 d 11.74±0.50 ab 4.29±0.62 a 70.00±0.54 bc −0.53±0.13 b 8.61±0.46 bc 2.58±0.06 a 180 46.09±0.42 d 1.34±0.27 d 12.17±0.45 a 4.40±0.35 a 70.53±0.66 bc −0.44±0.06 ab 8.64±0.21 bc 2.49±0.15 a 注：不同小写字母表示差异显著(P <0.05)。
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