高钙高蛋白日粮对海兰褐蛋鸡肝脏的影响
Effect of High Calcium and High Protein Diets on the Livers of Hyacinth Laying Hens
-
Keywords:
- high-calcium /
- high-protein /
- liver /
- uric acid
-
禽痛风是一种嘌呤代谢紊乱性疾病,又称尿酸盐沉积症[1]。禽痛风临床病例分为内脏型和关节型,严重的内脏型病例尿酸盐会沉积在禽类各个内脏表面,呈包膜形式包裹。关节型尿酸盐沉积在关节表面,病鸡跛行,蹲坐,不愿站立。引起禽痛风的常见原因有:饲料中蛋白质[2]和钙含量过高,维生素A缺乏[3],饮水不足,环境中空气污浊[4],霉菌毒素中毒,磺胺类药物中毒[5],以及能够损害肾脏的疾病,如肾型传染性支气管炎、传染性法氏囊病、传染性肾炎、鸡白痢和球虫病等[6]。痛风发病快,死亡率高,对养禽业经济效益具有巨大的威胁。
在生产实践中,经常发生高蛋白、高钙或高钙+高蛋白日粮引发鸡、鸭、鹅等家禽痛风的报道。迄今为止,尚无有效的治疗方法,主要通过降低饲料中蛋白、钙的水平,增加饲喂青绿饲料和多种维生素等方法来降低发病率。欲有效治疗饲料营养配比不当引起的禽痛风,首先应当明了其发病机制及对主要内脏器官的病理损害,为药物研发奠定基础。有关禽痛风的病理研究以肾脏居多[7-10],但肝脏病理研究较少,在解剖痛风患禽时发现有的肝脏发黄,但在组织细胞水平上发生何种病理变化尚不清楚。为此,我们针对高钙高蛋白日粮对鸡肝脏的影响进行研究。
1. 材料与方法
1.1 溶液配制
10%中性福尔马林缓冲液:40%甲醛100 mL,磷酸氢二钠6.5 g,无水磷酸二氢钠4 g,加蒸馏水900 mL,pH值7.2~7.4。油红O染色液(购自太阳生物有限公司)配方:饱和油红O原液按3∶2 (油红O∶蒸馏水)加入蒸馏水,混匀,温室放置5~10 min,过滤后使用(现配现用)。
1.2 动物及分组
80羽22日龄海兰褐蛋鸡,购自安徽省安庆市望江县大江公司养殖部,饲养至40日龄时,随机均分为4组:1组为对照组(蛋白17.5%、钙1%),2组为高钙组(钙4.5%),3组为高蛋白组(蛋白27%),4组为高钙+高蛋白组(蛋白27%、钙4.5%)。20~50日龄、50~90日龄及90~135日龄饲料组成和主要营养水平见表1~3。试验鸡笼养,自由采食和饮水。试验持续95 d。
表 1 各组饲料组成和营养水平(20~50 d)Table 1. The diet composition and nutritional levels in each group (20-50 d)% 项目
items组别 groups 1 2 3 4 营养水平nutritional levels 粗蛋白
crude protein18.25 18.25 27.00 27.00 钙calcium 1.00 4.50 1.00 4.50 组成
composition玉米corn 66.30 55.00 41.20 30.20 豆粕
soybean meal28.70 31.00 53.80 56.00 钙粉
calcium powder— 9.00 — 8.80 预混料premix 5.00 5.00 5.00 5.00 注:预混料每千克饲料提供:维生素 A14~29万IU、维生素 E≥350 IU、维生素 B1≥50 mg、维生素 B6≥80 mg、烟酰胺 ≥550 mg、叶酸 ≥16 mg、氯化胆碱 ≥7 000 mg、铜 5~700 mg、锰 1 000~3 000 mg、硒 2~10 mg、总磷 ≥2.6%、维生素D ≥35~9万IU、维生素 K340~75 mg、维生素 B2≥ 150 mg、维生素 B12≥0.3 mg、泛酸 280 mg、生物素≥1.8 mg、铁 1 600~15 000 mg、锌 1 000~3 000 mg、碘 6~100 mg、钙 16%~22%、氯化钠 5%~9%;下同。
Note: The premix provided the following per kilogram of diet: vitamin A 14-290 000 IU, vitamin E ≥350 IU, vitamin B1≥50 mg, vitamin B6≥80 mg, nicotinamide ≥550 mg, folic acid ≥16 mg, choline chloride≥7 000 mg, Cu 5-700 mg, Mn 1 000-3 000 mg, Se 2-10 mg, P ≥2.6%, vitamin D ≥35-90 000 IU, vitamin K 340-75 mg, vitamin B2≥150 mg, vitamin B12≥0.3 mg, pantothenic acid 280 mg, biotin ≥1.8 mg, Fe 1 600-15 000 mg, Zn 1 000-3 000 mg, I 6-100 mg, Ca 16%-22%, NaCl 5%-9%; the same as below.表 2 各组饲料组成和营养水平(50~90 d)Table 2. The diet composition and nutritional levels in each group (50-90 d)% 项目
items组别 groups 1 2 3 4 营养水平
nutritional levels粗蛋白
crude protein17.50 17.50 27.00 27.00 钙calcium 1.00 4.50 1.00 4.50 组成
composition玉米corn 68.5 57.3 41.2 30.2 豆粕
soybean meal26.5 28.7 53.8 56.0 钙粉
calcium powder— 9.0 — 8.8 预混premix 5.0 5.0 5.0 5.0 表 3 各组饲料组成和营养水平(90~135 d)Table 3. The diet composition and nutritional levels in each group (90-135 d)% 项目
items组别 groups 1 2 3 4 营养水平
nutritional levels粗蛋白
crude protein16.5 16.5 27.00 27.00 钙calcium 2.5 6 2.5 6 组成
composition玉米corn 66.6 53.6 36.6 25.4 豆粕
soybean meal24.6 27.1 54.7 56.9 钙粉
calcium powder3.9 14.2 3.6 12.7 预混料premix 5.0 5.0 5.0 5.0 1.3 临床观察
每天观察鸡的精神状态、食欲和粪便情况。死鸡解剖并记录。
1.4 样品采集和处理
第95天各组随机取6只鸡,用非抗凝管采血,于37 °C水浴0.5 h后3 000 r/min低温离心机离心分离血清,置于−20 °C冰箱保存。用全自动生化分析仪检测血清中尿酸(UA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、胆固醇(CH)和甘油三酯(TG)含量。试剂盒均购自上海复星长征医学科学有限公司。
试验结束时(第95天),每组随机抽取6只鸡扑杀,取新鲜肝脏在冰块上迅速剪碎,放到冻存管中,置于−80 °C冰箱保存。检测时将肝脏匀浆,用ELISA法检测肝脏匀浆中XOD、IL-1、IL-6和TNF-α,试剂盒均购自上海源叶生物有限公司,操作步骤按照说明书进行。另取肝脏组织固定于中性福尔马林溶液中,固定好后包埋切片,分别用HE和油红染色。
油红染色步骤:(1)蔗糖脱水:将福尔马林固定过的组织放置10%蔗糖溶液中,待组织沉底后取出,放置于20%蔗糖溶液中直至沉底,取出再放置于30%蔗糖溶液直至沉底,然后取出速冻。(2)冷冻切片:冷冻切片机调制−20 °C,OCT包埋剂包埋,切片厚度10~15 μm,切片干燥后入50%乙醇稍洗。(3)染色:油红O染液浸染8~10 min,50%乙醇分色,自来水洗,苏木紫(购自南京建成科技有限公司)复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片。
1.5 数据处理
数据以“mean±SD”表示,用SPSS 19.0软件进行方差分析。“*”和“**”分别表示试验组和对照组相比差异显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)。
2. 结果与分析
2.1 临床症状和剖解病变
试验组和对照组相比,鸡精神萎靡,有个别呆立,采食量下降,轻微腹泻。第95天解剖时可见各试验组有部分鸡肝脏发黄、易脆(图1)。
2.2 肝脏的病理组织学变化
2.2.1 HE染色
1组(对照组)肝细胞形态正常,肝细胞索呈放射状排列。2组(高钙组)细胞间隙明显增宽,有炎性细胞浸润。3组(高蛋白组)细胞肿胀、空泡化,肝索结构紊乱。4组(高钙高蛋白组)肝组织水肿,肝细胞发生变性坏死。肝细胞索排列紊乱(图2)。部分试验组鸡肝脏中有脂肪滴(图3)。
图 2 肝脏病理组织学观察(400×)注:A. 肝索结构呈放射状整齐排列,间隙正常;B. 肝细胞索排列紊乱、间隙增宽;C. 炎性浸润;D. 细胞空泡化;E. 组织水肿;F. 肝细胞变性坏死。Figure 2. Histopathological observation of liverNote: A. Hepatocyte cords arranged neatly and radially, and the gap between them is normal; B. Hepatocyte cords arranged disorder, and the gap between them became widening; C. Inflammatory infiltration; D. Liver cell vacuolization; E. Liver tissue edema; F. Degeneration and necrosis of liver cell.2.2.2 油红染色
肝脏切片油红O染色后观察,试验组部分鸡肝细胞内有大小不一的红色脂肪滴,而对照组鸡未见红色脂肪滴(图4)。
2.3 肝脏组织匀浆中XOD的检测结果
由图5可见:与对照组相比,试验组4组鸡肝脏组织匀浆中XOD活性值显著升高(P<0.05),2、3组与对照组间无显著差异(P>0.05)。
2.4 血清生化指标检测结果
由表4可见:试验组血清UA水平和ALT、AST活性值均高于1组,其中4组UA水平和AST活性显著高于对照组(P<0.05);试验组CH、HDL、TG和LDL与对照组间均无差异显著(P>0.05)。
表 4 各组血清生化指标检测结果Table 4. Serum biochemical indicators in each group项目
items组别 groups 1 2 3 4 UA/(μmol·L−1) 162.47±21.29 202.50±27.93 183.05±19.14 378.20±15.97* ALT/(U·L−1) 3.00±0.00 3.63±0.74 3.67±1.21 4.00±0.63 AST/(U·L−1) 199.67±7.23 216.63±17.74 207.67±5.508 273.67±102.62* CH/(mmol·L−1) 2.84±0.42 3.02±0.37 3.11±0.53 2.91±0.74 TG/(mmol·L−1) 0.44±0.04 0.46±0.26 0.40±0.10 0.51±0.10 HDL/(mmol·L−1) 1.64±0.28 1.59±0.36 1.67±0.29 1.56±0.34 LDL/(mmol·L−1) 0.72±0.31 0.61±0.14 0.59±0.24 0.53±0.18 注:同行数据后标*说明试验组和对照组相比在 0.05 水平上显著相关 (P<0.05);**说明在 0.01 水平上显著相关 (P<0.01);下同。
Note: Values in the same line followed by * are significantly different (P<0.05); values in the same line followed by ** are extreme significantly different (P<0.01); the same as below.由表5可见:4组的TP、ALB和A/G显著高于对照组(P<0.05),其他各组和1组间均无差异显著(P>0.05)。
表 5 血清TP、ALB和GLB指标测定结果Table 5. Change of serum TP, ALB and GLB for each groupsg/L 项目
items组别 groups 1 2 3 4 TP 41.94±6.71 45.27±3.29 41.62±5.01 53.0±17.66* ALB 13.88±1.17 15.17±0.61 13.68±1.37 21.50±17.39* GLB 28.10±5.52 30.10±2.84 27.94±3.69 31.50±10.03 A/G 0.52±0.08 0.51±0.03 0.50±0.00 0.77±0.68* 由表6可见:3、4组血清TBIL和4组血清DBIL显著低于1组(P<0.05),3个试验组血清IBIL均显著低于1组(P<0.05)。
表 6 血清TBIL、DBIL和IBIL指标测定结果Table 6. Change of serum TBIL, DBIL and IBIL for each groupsμmol/L 项目
items组别 groups 1 2 3 4 TBIL 12.18±5.35 12.23±2.89 3.84±0.77* 3.20±1.14* DBIL 0.83±0.20 0.61±0.48 0.66±0.15 0.40±0.20* IBIL 11.14±2.76 7.81±3.23* 4.07±1.56* 1.77±0.62* 2.5 肝脏组织匀浆中炎性因子检测结果
由表7可见:3、4组鸡肝脏IL-1含量显著高于1组(P<0.05);2、3组鸡肝脏IL-6显著高于1组(P<0.05),4组鸡IL-6极显著高于1组(P<0.01);3、4组鸡肝脏TNF-a极显著高于1组(P<0.01)。
表 7 肝组织匀浆IL-1、IL-6和TNF-α检测结果Table 7. The production of TNF-α, IL-1β and IL-6 in liverpg/mL 项目
items组别 groups 1 2 3 4 IL-1 221.51±24.38 242.28±43.13 280.53±67.03* 285.46±17.57* IL-6 16.25±1.97 24.86±11.00* 32.78±8.77* 28.59±2.00** TNF-α 18.27±4.34 21.06±4.60 35.44±2.62** 46.71±3.42** 3. 讨论
本试验结果显示:试验组鸡血清尿酸水平均高于对照组,其中4组显著高于对照组,说明高钙或/和高蛋白日粮提高了鸡血清的尿酸水平。高蛋白组鸡血清尿酸水平升高,可能是由于饲料中的蛋白质在鸡体内代谢所产生的尿酸盐过多,大于排泄速率所致[11]。高钙组鸡血清尿酸水平升高,可能是由于饲料中高钙低磷引起钙异位沉着,尿酸排出受阻所致[11]。
当肝细胞发生坏死或细胞膜通透性增强时,肝细胞内ALT、AST会进入血液,使血清ALT、AST酶的活性升高,试验组鸡肝内有炎性细胞浸润,肝细胞有坏死、空泡化的现象,与血清ALT和AST活性升高的结果相吻合,说明高钙或/和高蛋白日粮导致鸡肝脏受损,这与骆建兵[8]的研究结果一致。本试验研究还发现:除高钙组外,其他试验组TBIL均低于对照组,这似乎与试验组鸡血清ALT和AST活性升高相矛盾,田山[10]用高钙日粮饲喂鸡发现TBIL低于对照组,且检测血常规发现鸡发生了贫血,本试验虽未检测血常规,但也发现试验组鸡有眼结膜发白的现象。促红细胞生成素是由肾脏分泌的一种激素样物质,能够促进红细胞生成,而高尿酸会损伤肾脏,肾受损导致促红细胞生成素分泌减少可能是鸡发生贫血的原因之一。胆红素是血红素代谢的产物,主要来源于红细胞的血红蛋白,因此推断,饲喂高钙高蛋白日粮的鸡血清胆红素水平降低,可能是由于尿酸损伤肾脏引起贫血,从而使得胆红素生成减少所致。
许多研究证明:人的高尿酸血症与脂代谢紊乱密切相关,而家禽相关研究报道很少。人血清尿酸水平升高可以引起血脂异常(高TG低HDL血症)[12-14]。有学者认为高尿酸血症合并脂代谢紊乱的机理可能为血清中高尿酸导致体内脂蛋白脂酶活性下降,使甘油三酯分解代谢受限,从而引起血液中甘油三酯水平升高[15]。本试验中,试验组鸡的血清尿酸和甘油三酯水平升高,而HDL降低,与人医研究结果一致。过多的甘油三酯会导致人血液黏稠度增加,并增加患冠心病的危险性,并可能是单纯高尿酸血症发展为痛风的危险因素[16-17]。HDL由肝脏合成,具有抗动脉硬化和血栓形成的重要作用[16],而慢性肝炎和肝硬化患者的HDL降低。由上推测,本试验中试验组鸡血清HDL降低可能与血清尿酸水平升高和肝损伤都有关。
白蛋白主要在肝脏中合成,其合成能力同样是检验肝功能的重要指标。肝功能受损时,白蛋白合成降低,但是肝脏有巨大的功能贮备力,当60%~80%肝实质功能被破坏时,才会影响到ALB的合成[18],所以肝肿瘤、慢性肝炎等慢性肝病才会引起血清ALB减少;而在一般疾病状态下,ALB浓度不会有明显的变化。本试验发现试验组ALT、AST均高于对照组,说明肝功能受损,但4组ALB并未降低反而显著高于对照组,这可能是由于鸡肝实质损伤并未达到60%~80%,肝功能仍然有贮备力,所以肝内白蛋白合成不会明显减少。此外,动物脱水时会引起白蛋白浓缩[10],试验组鸡均发生了腹泻,而腹泻会导致脱水,尤以4组腹泻严重,这也可能是4组鸡白蛋白不降低反而高于对照组的又一原因。
血清球蛋白由单核—吞噬细胞合成,球蛋白增高可见于慢性肝病、自身免疫性疾病[19-20]。本试验中,试验组鸡的球蛋白升高,肝中炎症因子IL-1、IL-6和TNF-α的水平增加,说明肝脏中发生了炎性反应,光学显微镜下观察到试验组鸡肝组织内有炎性细胞浸润和坏死灶,进一步从组织学变化验证了肝脏的受损情况和炎症变化。
4. 结论
高钙、高蛋白、高钙+高蛋白日粮使海兰褐蛋鸡血清尿酸水平升高,肝功能和结构不同程度地受损,其中高钙高蛋白组尿酸水平最高,肝功能和结构受损最为严重。
-
图 2 肝脏病理组织学观察(400×)
注:A. 肝索结构呈放射状整齐排列,间隙正常;B. 肝细胞索排列紊乱、间隙增宽;C. 炎性浸润;D. 细胞空泡化;E. 组织水肿;F. 肝细胞变性坏死。
Figure 2. Histopathological observation of liver
Note: A. Hepatocyte cords arranged neatly and radially, and the gap between them is normal; B. Hepatocyte cords arranged disorder, and the gap between them became widening; C. Inflammatory infiltration; D. Liver cell vacuolization; E. Liver tissue edema; F. Degeneration and necrosis of liver cell.
表 1 各组饲料组成和营养水平(20~50 d)
Table 1 The diet composition and nutritional levels in each group (20-50 d)
% 项目
items组别 groups 1 2 3 4 营养水平nutritional levels 粗蛋白
crude protein18.25 18.25 27.00 27.00 钙calcium 1.00 4.50 1.00 4.50 组成
composition玉米corn 66.30 55.00 41.20 30.20 豆粕
soybean meal28.70 31.00 53.80 56.00 钙粉
calcium powder— 9.00 — 8.80 预混料premix 5.00 5.00 5.00 5.00 注:预混料每千克饲料提供:维生素 A14~29万IU、维生素 E≥350 IU、维生素 B1≥50 mg、维生素 B6≥80 mg、烟酰胺 ≥550 mg、叶酸 ≥16 mg、氯化胆碱 ≥7 000 mg、铜 5~700 mg、锰 1 000~3 000 mg、硒 2~10 mg、总磷 ≥2.6%、维生素D ≥35~9万IU、维生素 K340~75 mg、维生素 B2≥ 150 mg、维生素 B12≥0.3 mg、泛酸 280 mg、生物素≥1.8 mg、铁 1 600~15 000 mg、锌 1 000~3 000 mg、碘 6~100 mg、钙 16%~22%、氯化钠 5%~9%;下同。
Note: The premix provided the following per kilogram of diet: vitamin A 14-290 000 IU, vitamin E ≥350 IU, vitamin B1≥50 mg, vitamin B6≥80 mg, nicotinamide ≥550 mg, folic acid ≥16 mg, choline chloride≥7 000 mg, Cu 5-700 mg, Mn 1 000-3 000 mg, Se 2-10 mg, P ≥2.6%, vitamin D ≥35-90 000 IU, vitamin K 340-75 mg, vitamin B2≥150 mg, vitamin B12≥0.3 mg, pantothenic acid 280 mg, biotin ≥1.8 mg, Fe 1 600-15 000 mg, Zn 1 000-3 000 mg, I 6-100 mg, Ca 16%-22%, NaCl 5%-9%; the same as below.表 2 各组饲料组成和营养水平(50~90 d)
Table 2 The diet composition and nutritional levels in each group (50-90 d)
% 项目
items组别 groups 1 2 3 4 营养水平
nutritional levels粗蛋白
crude protein17.50 17.50 27.00 27.00 钙calcium 1.00 4.50 1.00 4.50 组成
composition玉米corn 68.5 57.3 41.2 30.2 豆粕
soybean meal26.5 28.7 53.8 56.0 钙粉
calcium powder— 9.0 — 8.8 预混premix 5.0 5.0 5.0 5.0 表 3 各组饲料组成和营养水平(90~135 d)
Table 3 The diet composition and nutritional levels in each group (90-135 d)
% 项目
items组别 groups 1 2 3 4 营养水平
nutritional levels粗蛋白
crude protein16.5 16.5 27.00 27.00 钙calcium 2.5 6 2.5 6 组成
composition玉米corn 66.6 53.6 36.6 25.4 豆粕
soybean meal24.6 27.1 54.7 56.9 钙粉
calcium powder3.9 14.2 3.6 12.7 预混料premix 5.0 5.0 5.0 5.0 表 4 各组血清生化指标检测结果
Table 4 Serum biochemical indicators in each group
项目
items组别 groups 1 2 3 4 UA/(μmol·L−1) 162.47±21.29 202.50±27.93 183.05±19.14 378.20±15.97* ALT/(U·L−1) 3.00±0.00 3.63±0.74 3.67±1.21 4.00±0.63 AST/(U·L−1) 199.67±7.23 216.63±17.74 207.67±5.508 273.67±102.62* CH/(mmol·L−1) 2.84±0.42 3.02±0.37 3.11±0.53 2.91±0.74 TG/(mmol·L−1) 0.44±0.04 0.46±0.26 0.40±0.10 0.51±0.10 HDL/(mmol·L−1) 1.64±0.28 1.59±0.36 1.67±0.29 1.56±0.34 LDL/(mmol·L−1) 0.72±0.31 0.61±0.14 0.59±0.24 0.53±0.18 注:同行数据后标*说明试验组和对照组相比在 0.05 水平上显著相关 (P<0.05);**说明在 0.01 水平上显著相关 (P<0.01);下同。
Note: Values in the same line followed by * are significantly different (P<0.05); values in the same line followed by ** are extreme significantly different (P<0.01); the same as below.表 5 血清TP、ALB和GLB指标测定结果
Table 5 Change of serum TP, ALB and GLB for each groups
g/L 项目
items组别 groups 1 2 3 4 TP 41.94±6.71 45.27±3.29 41.62±5.01 53.0±17.66* ALB 13.88±1.17 15.17±0.61 13.68±1.37 21.50±17.39* GLB 28.10±5.52 30.10±2.84 27.94±3.69 31.50±10.03 A/G 0.52±0.08 0.51±0.03 0.50±0.00 0.77±0.68* 表 6 血清TBIL、DBIL和IBIL指标测定结果
Table 6 Change of serum TBIL, DBIL and IBIL for each groups
μmol/L 项目
items组别 groups 1 2 3 4 TBIL 12.18±5.35 12.23±2.89 3.84±0.77* 3.20±1.14* DBIL 0.83±0.20 0.61±0.48 0.66±0.15 0.40±0.20* IBIL 11.14±2.76 7.81±3.23* 4.07±1.56* 1.77±0.62* 表 7 肝组织匀浆IL-1、IL-6和TNF-α检测结果
Table 7 The production of TNF-α, IL-1β and IL-6 in liver
pg/mL 项目
items组别 groups 1 2 3 4 IL-1 221.51±24.38 242.28±43.13 280.53±67.03* 285.46±17.57* IL-6 16.25±1.97 24.86±11.00* 32.78±8.77* 28.59±2.00** TNF-α 18.27±4.34 21.06±4.60 35.44±2.62** 46.71±3.42** -
[1] LIN K, LIN H, CHOU P. Community based epidemiological study on hyperuricemia and gout in Kin-Hu, Kinmen[J]. Journal of Rheumatology, 2000, 27(4): 1045.
[2] GUO X, HUANG K, TANG J. Clinicopathology of gout in growing layers induced by high calcium and high protein diets[J]. British Poultry Science, 2005, 46(5): 641. DOI: 10.1080/00071660500302661.
[3] 窦磊磊. 鹅痛风的病因、症状、诊断与防治措施[J]. 现代畜牧科技, 2017(1): 59. DOI: 10.19369/j.cnki.2095-9737.2017.01.051. [4] 仝宗喜. 非病原性因子与鸡肾病的关系[J]. 今日畜牧兽医, 2011(1): 41. [5] 李涌. 家禽发生痛风病因和防治[J]. 农业开发与装备, 2017(5): 187. DOI: 10.3969/j.issn.1673-9205.2017.05.160. [6] 段雪磊, 马奎红, 程士航, 等. 家禽痛风的综合防治措施[J]. 养禽与禽病防治, 2015(8): 19. [7] 唐建霞, 黄克和, 郭小权, 等. 高钙与高蛋白日粮诱发鸡痛风[J]. 中国兽医学报, 2005, 25(2): 203. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2005.02.031. [8] 骆建兵. 高钙高蛋白日粮对鸡肝肾功能与酸碱平衡的影响及痛风形成机理研究[D]. 南京: 南京农业大学, 2006. [9] 林志健, 李凡, 张冰. 禽类动物高尿酸血症的研究进展[J]. 中国实验动物学报, 2017, 25(5): 572. DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2017.05.019. [10] 田山. 高钙日粮和肾型传染性支气管炎病毒致鸡痛风的临床病理学比较研究[D]. 南昌: 江西农业大学, 2012. [11] 王建华. 兽医内科学[M]. 4版. 北京: 中国农业出版社, 2010. [12] 吴珊珊, 叶山东, 邢燕, 等. 高尿酸血症与体质量指数和脂代谢紊乱关系的临床研究[J]. 中国临床保健杂志, 2016, 19(3): 232. DOI: 10.3969/J.issn.1672-6790.2016.03.003. [13] 郭学敏. 高尿酸血症和糖、脂代谢紊乱及高血压之间的关系[J]. 齐鲁医学杂志, 2008, 23(6): 524. [14] 高素颖, 颜应琳, 于凯, 等. 代谢综合征及其组分与老年血尿酸水平的关系[J]. 中国全科医学, 2015, 18(17): 1995. DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.17.003. [15] 梁敏栩, 叶静萍, 赵思文. 高尿酸血症相关因素调查分析[J]. 现代医院, 2009, 9(3): 28. DOI: 10.3969/j.issn.1671-332X.2009.03.012. [16] 张义, 刘广山. 自己看化验单[M]. 2版. 济南: 山东科学技术出版社, 2012. [17] 周慧, 刘振, 李长贵, 等. 痛风与单纯性高尿酸血症人群高脂血症的对比分析[J]. 现代生物医学进展, 2017, 17(17): 3278. DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2017.17.019. [18] 黄克和, 王小龙. 兽医临床病理学(兽医实验室医学)[M]. 2版. 北京: 中国农业出版社, 2012. [19] 徐克前. 临床生物化学检验[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2014. [20] 徐克成, 孟宪镛. 肝病实验室检查的临床意义[M]. 南京: 江苏科学技术出版社, 1981. -
期刊类型引用(1)
1. 何春燕,罗嫚,兰卡边初,喻世刚,王钢,廖娟. 沐川乌骨黑鸡体重体尺指标产蛋性能与内脏指标的相关性分析. 当代畜牧. 2021(05): 15-18 . 百度学术
其他类型引用(2)