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鸡蛋花微体快繁技术研究

呼延丽, 李丹, 毕玮, 杨卫, 冯丹, 吴涛

呼延丽, 李丹, 毕玮, 等. 鸡蛋花微体快繁技术研究[J]. 云南农业大学学报(自然科学), 2018, 33(2): 301-307. DOI: 10.12101/j.issn.1004-390X(n).201705064
引用本文: 呼延丽, 李丹, 毕玮, 等. 鸡蛋花微体快繁技术研究[J]. 云南农业大学学报(自然科学), 2018, 33(2): 301-307. DOI: 10.12101/j.issn.1004-390X(n).201705064
Li HUYAN, Dan LI, Wei BI, et al. Study on the Micropropagation of Plumeria rubra var. acutifolia[J]. JOURNAL OF YUNNAN AGRICULTURAL UNIVERSITY(Natural Science), 2018, 33(2): 301-307. DOI: 10.12101/j.issn.1004-390X(n).201705064
Citation: Li HUYAN, Dan LI, Wei BI, et al. Study on the Micropropagation of Plumeria rubra var. acutifolia[J]. JOURNAL OF YUNNAN AGRICULTURAL UNIVERSITY(Natural Science), 2018, 33(2): 301-307. DOI: 10.12101/j.issn.1004-390X(n).201705064

鸡蛋花微体快繁技术研究

基金项目: 云南省森林植物培育与开发利用重点实验室开放基金(2014KF01)
详细信息
    作者简介:

    呼延丽(1969—),女,云南开远人,工程师,主要从事植物组织培养及森林培育方面的研究。E-mail: 825154973@qq.com

    通信作者:

    吴涛(1979—),男,云南宣威人,博士,副研究员,主要从事林木遗传育种和生理研究。 ynafwt@126.com

摘要:
目的 开展鸡蛋花微体快繁技术研究,为实现优良品种(系)的无性快繁提供技术保障。
方法 以鸡蛋花无菌苗的顶芽为外植体,以1/2 MS为基本培养基,研究不同质量浓度的细胞分裂素和生长素及其配比对鸡蛋花不定芽诱导、伸长和生根的影响。
结果 不定芽诱导培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系数为4.2;试管苗伸长培养基为1/2 MS+NAA 0.05 mg/L;试管苗不定根诱导培养基为:1/2 MS+3.0 mg/L IBA,生根率为93.3%;试管苗在V(珍珠岩): V(草炭土)=1: 2的基质中的移栽成活率达到86%。
结论 获得了鸡蛋花不定芽诱导、伸长、生根的最佳培养基和适宜的移栽基质,建立了微体快繁技术体系。

 

Study on the Micropropagation of Plumeria rubra var. acutifolia

Abstract:
Purpose The micropropagation of Plumeria rubra var. acutifolia was studied in order to provide the technical support for the rapid propagation of superior varieties (lines).
Method The technology system of micropropagation was established on 1/2 MS medium plus cytokinin (6-BA) and auxin (NAA and IBA) using the terminal buds of sterile seedlings as explants.
Results The suitable medium for induction of adventitious bud was 1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA, and the proliferation rate of bud was 4.2-fold. The suitable medium for prolongation of plantlets was 1/2 MS+0.05 mg/L NAA. The suitable medium for induction of adventitious root was 1/2 MS+3.0 mg/L IBA, and the rooting rate of plantlets was 93.3%. The mixed substratum with perlite and peat soil (1:2, volume ratio) was good for transplanting in acclimatization stage, and the survival rate of transplanted plantlets was 86%.
Conclusion The optimum medium and suitable transplanting medium for adventitious bud induction, elongation and rooting were obtained, and the micropropagation system was established in P. rubra var. acutifolia.

 

  • 鸡蛋花(Plumeria rubra var. acutifolia)属夹竹桃科鸡蛋花属落叶灌木或小乔木,叶呈纺梭状,夏初始花,一直开到深秋,花由五片花瓣构成,呈螺旋状散开,瓣边白色,瓣心金黄,恍如鸡蛋的蛋白把蛋黄包裹在心部一样,故称鸡蛋花。另有一些桃红或红色的品种,但以黄色的为主[1-2]。研究表明:迄今从鸡蛋花中分离并获得的化学成分有环烯醚萜类、三萜类、黄酮醇类、醇类、醛类、脂肪酸类等成分,生物活性功能主要用于抗肿瘤作用、抗真菌作用以及清热、润肺解毒等方面[3],TAN等[4]、VERMANI等[5]还发现鸡蛋花中的黄鸡蛋花素对HIV病毒逆转录过程有抑制作用。因此,鸡蛋花既可作庭院观赏植物,又是食药兼用植物。

    鸡蛋花属植物有7种,原产于美洲热带地区。现广植于亚洲热带及亚热带地区。中国南部、西南部及东部均有栽培1种及1栽培变种[1]。通过引种,目前中国种植的除变种黄花鸡蛋花(P. rubra var. acutifolia)之外,还有红鸡蛋花(P. rubra)、钝头鸡蛋花(P. obtusa)等种以及杂交鸡蛋花(P. × hybrida)、三色鸡蛋花(P. rubra ‘Tricolor’)、‘泻湖’(P. rubra ‘Laguna’)、‘彩虹’(P.rubra ‘Rainbow Anuenue’)和‘日落’(P. rubra ‘Sunset’)等栽培种[6]。深圳已引进很多的鸡蛋花新栽培品种,湛江也积极引进鸡蛋花新品种进行园林应用,南亚热带作物研究所已引进收集了10多个新品种,且正在开展种子育苗的工作[6-8]。由于鸡蛋花大部分新品种引入中国的时间不长,使用扦插方法繁殖系数低,因此在目前市场上种苗较少,尤其是深受人们偏爱的红花品种售价高,大树稀缺,故在园林上的应用并不多见。另外,由于鸡蛋花具有传粉障碍,自然条件下很少结实[9]。常规繁殖方式以扦插为主,但由于主、侧枝年生长量十分有限,快速扩繁受到很大制约。采用组织培养的方法是加快鸡蛋花繁育、保持优良特性和保存种植资源最有效的途径。当前关于鸡蛋花组培的研究仅有零星报道,MILLER等[10]报道幼嫩材料作外植体效果好,而成熟材料则生长缓慢;国内仅朱靖杰等[11]、陈瑜珍等[12]尝试用种子无菌苗作外植体进行组织培养,但技术体系还不成熟。因此,本项研究以鸡蛋花无菌苗顶芽为外植体,通过筛选出有利于不定芽诱导及生根壮苗的培养基配方,初步建立鸡蛋花不定芽诱导及其生根的组织培养技术体系,为保持鸡蛋花优良母树性状,增加优良苗木的来源,推进其快繁体系的建立和种质离体保存提供技术支撑。

    鸡蛋花成熟种子于2015年采自中国科学院西双版纳热带植物园,4 ℃保存。试验时用自来水浸泡48 h,舍弃漂浮种子,搓洗余下种子后用流动自来水冲洗10~30 min。超净工作台上用0.1%升汞消毒8~15 min,之后用无菌水涮洗4~5次,每次3 min。用镊子和解剖刀剥去种皮后,接种于1/2 MS+蔗糖10 g/L培养基上培养为无菌苗,备用。

    选择培养20 d左右、生长健壮的鸡蛋花无菌苗,切取其带顶芽茎段为外植体进行不定芽的诱导。诱导培养基以1/2 MS作为基本培养基,进行细胞分裂素6-BA (0、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L)与生长素NAA (0、0.01、0.1、0.5 mg/L)的两因素交叉分组试验(表1)。选择长短和粗细基本一致的外植体300个,随机分成20组,每组15个,即每处理接种外植体5个,重复3次。于接种后1个月记录外植体生长状况并计算不定芽的诱导增殖情况,筛选较佳的鸡蛋花不定芽诱导培养基。

    增殖系数=萌生的不定芽总数/接种的外植体总数。

    以筛选出的较佳的鸡蛋花不定芽诱导培养基进行鸡蛋花不定芽的诱导,培养1个月左右,将分化不定芽的外植体转移至添加生长素NAA 0、0.01、0.05、0.l、0.5 mg/L的1/2 MS培养基上进行不定芽的伸长培养。试验采用单因素的完全随机设计,每处理接种不定芽10个,重复3次。4~5周后观察不定芽的伸长情况。

    将长至2~3 cm的不定芽从基部单个切下,接种到1/2 MS生根培养基上进行不定根诱导。生根培养基中添加不同质量浓度的生长素IBA:0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mg/L。试验采用单因素的完全随机设计,每处理接种不定芽10个,重复3次。5周后统计生根率。

    生根率=(生根的不定芽数/接种的不定芽总数)×100%。

    不定芽诱导、伸长和生根培养基均添加蔗糖30 g/L、琼脂6 g/L,pH 5.8,121 ℃灭菌20 min。培养温度为(25±2) ℃,光照强度5 000 lx,光照时间14 h。

    试管苗生根并长到1~1.5 cm时移栽到2种基质中:(1)珍珠岩+红壤(1: 1,体积比),(2)珍珠岩+草炭土(1: 2,体积比)。基质提前1周用百菌清50%可湿性粉剂600倍液喷淋消毒。移栽前先将瓶盖打开,炼苗5~7 d后将生根苗取出,洗去培养基后栽植到基质中。

    将各处理所得的诱导发生指标和生长指标用Excel 2007录入,通过SPSS 19.0软件进行方差分析,对差异显著的各处理采用两两比较法(SNK法)进行各处理间指标均数的多重比较。

    6-BA和NAA不同质量浓度配比对鸡蛋花顶芽外植体不定芽诱导的影响不同(表1)。不定芽诱导培养4周左右,在6-BA质量浓度为0 mg/L时,NAA质量浓度无论高低,外植体均保持绿色,几乎无生长迹象,无不定芽的分化。在6-BA质量浓度为0.5~2.0 mg/L时,不定芽诱导生成的数量随NAA质量浓度的增加(0~0.5 mg/L)表现出逐渐增高的趋势;在6-BA质量浓度为5.0 mg/L时,外植体基部膨大且愈伤化严重,有的突起形成畸形的“芽状体”,但无有效的不定芽生成。在NAA质量浓度一定时,不定芽诱导生成的数量随6-BA质量浓度(0~5.0 mg/L)的增加呈现出先增加后降低的趋势。

    不定芽数的方差分析显示:6-BA的P=0.000<0.01,NAA的P=0.000<0.01,6-BA与NAA的互作P=0.000<0.01,表明6-BA、NAA及其互作对鸡蛋花诱导不定芽的发生均有极显著的影响。进一步进行6-BA各水平均数间、NAA各水平均数间、6-BA与NAA水平组合均数间的多重比较,结果见表1~3。由表2可知:6-BA质量浓度为1.0 、2.0 mg/L时,不定芽诱导均数差异不显著,但较0.5 mg/L时差异显著,说明6-BA的适宜质量浓度为1.0 mg/L。由表3可知:NAA质量浓度为0.5 mg/L时,不定芽诱导均数反而较0.1 mg/L时有所下降,且0.1 mg/L时的不定芽诱导均数与其他各处理质量浓度的不定芽诱导均数差异均显著,说明NAA的适宜质量浓度为0.1 mg/L。

    表1列出了6-BA与NAA水平组合所得到的不定芽诱导数、增殖系数和芽长各统计指标均数间的多重比较结果。不定芽诱导生成的数量以处理11 (6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L)条件下最高(图1a),达到63个,增殖系数为4.2,平均芽长也最高,为4.1 cm;处理15 (6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L)条件下不定芽诱导生成的数量也较高,达到60个,增殖系数为4.0,但平均芽长为3.3 cm,与处理11差异显著。综合以上所述数据,初步确定鸡蛋花不定芽诱导时适宜的激素组合为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。

    表  1  6-BA和NAA配比对鸡蛋花不定芽诱导和增殖的影响
    Table  1.  Effect of 6-BA and NAA on adventitious bud induction and proliferation of explants in P. rubra var. acutifolia
    处理编号
    No.
    w(6-BA)/
    (mg·L−1)
    w(NAA)/
    (mg·L−1)
    接种外植体数
    number of explants
    诱导的不定芽数
    number of buds
    增殖系数
    proliferation rate
    不定芽的平均芽长/
    cm bud height
    不定芽的生长状态
    growth state of buds
    1 0 0 15 0 0 无不定芽生成
    2 0 0.01 15 0 0
    3 0 0.1 15 0 0
    4 0 0.5 15 0 0
    5 0.5 0 15 21 D 1.4 D 1.6 D 不定芽生长比较健壮,叶色绿
    6 0.5 0.01 15 24 D 1.6 D 2.3 C
    7 0.5 0.1 15 31 C 2.1 C 2.5 C
    8 0.5 0.5 15 33 C 2.2 B 2.6 C
    9 1.0 0 15 27 CD 1.8 D 2.3 C 不定芽生长健壮,
    叶色绿
    10 1.0 0.01 15 34 C 2.3 B 3.6 A
    11 1.0 0.1 15 63 A 4.2 A 4.1 A
    12 1.0 0.5 15 60 A 4.0 A 3.8 A
    13 2.0 0 15 35 C 2.3 B 2.5 C 不定芽生长健壮,
    叶色浅绿
    14 2.0 0.01 15 42 B 2.8 B 3.4 B
    15 2.0 0.1 15 60 A 4.0 A 3.6 A
    16 2.0 0.5 15 47 B 3.1 B 3.4 B
    17 5.0 0 15 形成畸形的“芽状体”,无有效的不定芽
    18 5.0 0.01 15
    19 5.0 0.1 15
    20 5.0 0.5 15
    注:各列数值后的不同字母表示各处理间差异显著(SNK检验,P<0.01);下同。
    Note: Different capital letters represente extremely significant difference in the same rows (P<0.01, SNK test); the same as below.
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    表  2  6-BA不同质量浓度处理间不定芽诱导均数的两两比较(SNK法)
    Table  2.  SNK multiple comparisons among the average number of adventitious bud induction under different mass concentrations of 6-BA treatments
    w(6-BA)/
    (mg·L−1)
    n 子集subset
    1 2 3
    水平1(0) 12 0.00
    水平2(0.5) 12 9.08
    水平3(1.0) 12 15.33
    水平4(2.0) 12 15.33
    Sig. 1.00 1.00 1.00
        注:6-BA质量浓度为5.0 mg/L时,由于无有效芽生成,故未进行统计分析。
        Note:When the concentration of 6-BA was 5.0 mg/L, no statistical analysis was executed because there was no effective bud formation.
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    表  3  NAA不同质量浓度处理间不定芽诱导均数的两两比较(SNK法)
    Table  3.  SNK multiple comparisons among the average number of adventitious bud induction under different mass concentrations of NAA treatments
    w(NAA)/ (mg·L−1) n 子集subset
    1 2 3 4
    水平1(0) 12 6.92
    水平2(0.01) 12 8.33
    水平4(0.5) 12 11.67
    水平3(0.1) 12 12.83
    Sig. 1.00 1.00 1.00 1.00
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    在NAA质量浓度为0~0.5 mg/L范围内,鸡蛋花不定芽均有一定程度的伸长(表4图1b),伸长效果以处理24 (0.1 mg/L NAA)为最佳,不定芽平均长度达到5.7 cm,但不定芽发生玻璃化的数量也最高,玻璃化率达到19.5%。当NAA质量浓度达到0.5 mg/L时,外植体基部愈伤化严重,愈伤组织质地硬脆;不定芽伸长受到抑制,不定芽平均长度只有3.2 cm,与无NAA时(处理21)基本一致。结合不定芽平均芽长和玻璃化率的数据,确定较佳的鸡蛋花不定芽伸长培养基为1/2 MS+NAA 0.05 mg/L。

    表  4  不同质量浓度NAA对不定芽伸长的影响
    Table  4.  Effects of different mass concentrations of NAA on the elongation of adventitious buds
    处理编号
    No
    w(NAA)/
    (mg·L−1)
    接种外植体数
    number of explants
    不定芽数
    number of buds
    平均芽长 / cm
    bud height
    玻璃化的不定芽数
    number of vitrified buds
    玻璃化率 / %
    ratio of vitrified buds
    21 0 30 55 C 2.8 C 3 C 5.5 C
    22 0.01 30 82 B 4.2 B 5 C 6.1 C
    23 0.05 30 137 A 5.5 A 17 B 12.4 B
    24 0.l 30 133 A 5.7 A 26 A 19.5 A
    25 0.5 30 124 A 3.2 C 15 B 12.1 B
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    伸长培养的不定芽切下后接种到添加不同质量浓度IBA的生根培养基上进行不定根诱导,生根情况见表5图1c1图1c2。处理26 (0 mg/L IBA)中的不定芽基部没有愈伤组织产生,茎有一定伸长生长,无不定根的分化;处理27~32 (0.5~5.0 mg/L IBA)中的不定芽均有一定数量的白色不定根生成。IBA质量浓度范围为0.5~3.0 mg/L时,生根率、平均根数与平均根长均呈升高趋势,IBA质量浓度范围为3.0~5.0 mg/L时,生根率、平均根数与平均根长呈现降低趋势。由此确定鸡蛋花试管苗不定根诱导的最佳培养基为1/2 MS+3.0 mg/L IBA。

    表  5  不同IBA质量浓度对不定芽诱导生根的影响
    Table  5.  Effects of different mass concentrations of IBA on the rooting of adventitious buds
    处理编号
    No
    w(IBA)/
    (mg·L−1)
    接种不定芽数
    number of buds
    生根不定芽数
    number of buds rooted
    生根率 / %
    ratio of rooted buds
    平均根数
    average root number
    平均根长 / cm
    average root length
    26 0 30 0 D 0.00 E 0.0 D 0 D
    27 0.5 30 10 C 33.33 D 1.2 C 0.9 C
    28 1.0 30 16 C 53.33 C 1.6 C 1.5 C
    29 2.0 30 20 B 66.67 C 2.7 B 2.7 A
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    红壤、草炭土与珍珠岩配成2种基质(表6),处理34[V(珍珠岩):V(草炭土)=1: 2]的组培苗移栽成活株数和成活率分别为43和86.0% (图1d),较处理33[V(珍珠岩):V(红壤)=1: 1]的高,且差异显著。由此确定草炭土较红壤更适宜于鸡蛋花组培苗移栽成活。

    表  6  不同基质对鸡蛋花组培苗移栽成活率的影响
    Table  6.  Effects of different substrates on the survival rate of the transplanted plantlets in P. var. acutifolia
    处理编号
    No.
    基质成分及配比
    substratum composition
    and proportion
    移栽株数
    number of
    transplanted plantlets
    成活株数
    number of
    survived plantlets
    成活率
    survival ratio of
    plantlets
    生长状况
    growth state of
    plantlets
    33 V(珍珠岩):V(红壤)=1: 1 50 35 B 70.0 B 叶片舒展,植株健壮
    34 V(珍珠岩):V(草炭土)=1: 2 50 43 A 86.0 A 叶片舒展,植株健壮
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    图  1  鸡蛋花不定芽诱导途径的微体快繁
    注:a) 不定芽的诱导结果;b) 不定芽的伸长培养;c) 不定芽的生根培养,基部无愈伤(1)和基部有少量愈伤(2);d) 基质[V(珍珠岩):V(草炭土)=1: 2]移栽后的生长情况。
    Figure  1.  Micropropagation of the adventitious bud induction pathway in P. rubra var. acutifolia
    Note: a) induction of adventitious buds; b) elongation of adventitious buds; c) rooting of adventitious buds without callus (1) and bearing few calluses (2); d) growth state of plantlets on substratum (1 perlite : 2 peat soil).

    鸡蛋花的常规繁殖方法包括扦插繁殖、压条繁殖、嫁接繁殖、种子繁殖等,然而这些常规方法繁殖速度慢、周期长,远远不能满足需求,故而有一些采用组织培养快速繁殖鸡蛋花的研究。罗勤等[13]以红花鸡蛋花叶片为外植体,经诱导形成愈伤组织后,再经愈伤组织分化、芽增殖和生根培养,形成完整植株小苗。然而,其采用叶片作为外植体,该外植体大多由已分化的细胞组成,其再生成植株通常需要经历从分化状态恢复到分生组织状态的脱分化过程,而经脱分化的细胞在一定条件下经愈伤组织阶段再分化出芽或胚状体而形成植株时,其后代易发生变异。本研究建立的微体快繁技术体系采用的是不经过愈伤分化而直接诱导不定芽的途径,其优点是再生的植株不会产生变异,能够保持亲本的优良性状。与常见的诱导愈伤组织、再诱导芽和根形成的器官发生途径相比较而言,本项研究通过诱导不定芽形成、再诱导不定芽生根的不定芽途径技术体系,操作过程较简单、周期相对较短,是一种可行性较强的组培快繁途径。本项研究以种子无菌萌发苗的带顶芽茎段为原始材料建立了鸡蛋花微体快繁技术体系,能作为鸡蛋花优良母树快繁的参考。

    外源生长调节剂的种类、质量浓度和配比是影响木本植物不定芽诱导的最主要因素之一[14]。细胞分裂素与生长素质量浓度的比值较高时有利于不定芽的直接诱导;当二者比值低时有利于生根。朱靖杰等[11]和陈瑜珍等[12]筛选出的适宜鸡蛋花不定芽诱导的培养基中,细胞分裂素与生长素质量浓度的比值分别为300:1 (6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L)和10:1 (6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L)。本项研究中,细胞分裂素与生长素质量浓度的比值分别为10:1 (6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L),与陈瑜珍等[11]的结果一致,但其绝对质量浓度更低,是其一半。这可能和外植体取材母树或来源有关,也在一定程度上说明鸡蛋花不定芽直接诱导时,细胞分裂素BA筛选的绝对质量浓度范围以1~3 mg/L为宜,范围较窄;而生长素NAA的绝对质量浓度范围较广,可相差20倍(0.01~0.2 mg/L)。同时,本项研究发现:在鸡蛋花不定芽诱导过程中,诱导培养基中单独添加6-BA即可诱导不定芽形成,但不定芽较短、生长较慢;而6-BA单独使用且质量浓度较高时(5.0 mg/L),仅能形成绿色的不规则点状突起,不能生成有效芽。当6-BA配合一定NAA后形成的不定芽其生长状态较佳,说明NAA对鸡蛋花不定芽的诱导、分化与生长均有促进作用。

    本项研究以鸡蛋花无菌苗的顶芽为外植体,初步建立了鸡蛋花不定芽增殖、伸长和生根的微体快繁体系:不定芽增殖培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;试管苗伸长培养基为1/2 MS+NAA 0.05 mg/L;试管苗不定根诱导培养基为1/2 MS+3.0 mg/L IBA。本研究初步建立了鸡蛋花不定芽诱导及植株再生微体快繁技术体系,可为鸡蛋花优良无性系生产利用提供一条高效途径。

  • 图  1   鸡蛋花不定芽诱导途径的微体快繁

    注:a) 不定芽的诱导结果;b) 不定芽的伸长培养;c) 不定芽的生根培养,基部无愈伤(1)和基部有少量愈伤(2);d) 基质[V(珍珠岩):V(草炭土)=1: 2]移栽后的生长情况。

    Figure  1.   Micropropagation of the adventitious bud induction pathway in P. rubra var. acutifolia

    Note: a) induction of adventitious buds; b) elongation of adventitious buds; c) rooting of adventitious buds without callus (1) and bearing few calluses (2); d) growth state of plantlets on substratum (1 perlite : 2 peat soil).

    表  1   6-BA和NAA配比对鸡蛋花不定芽诱导和增殖的影响

    Table  1   Effect of 6-BA and NAA on adventitious bud induction and proliferation of explants in P. rubra var. acutifolia

    处理编号
    No.
    w(6-BA)/
    (mg·L−1)
    w(NAA)/
    (mg·L−1)
    接种外植体数
    number of explants
    诱导的不定芽数
    number of buds
    增殖系数
    proliferation rate
    不定芽的平均芽长/
    cm bud height
    不定芽的生长状态
    growth state of buds
    1 0 0 15 0 0 无不定芽生成
    2 0 0.01 15 0 0
    3 0 0.1 15 0 0
    4 0 0.5 15 0 0
    5 0.5 0 15 21 D 1.4 D 1.6 D 不定芽生长比较健壮,叶色绿
    6 0.5 0.01 15 24 D 1.6 D 2.3 C
    7 0.5 0.1 15 31 C 2.1 C 2.5 C
    8 0.5 0.5 15 33 C 2.2 B 2.6 C
    9 1.0 0 15 27 CD 1.8 D 2.3 C 不定芽生长健壮,
    叶色绿
    10 1.0 0.01 15 34 C 2.3 B 3.6 A
    11 1.0 0.1 15 63 A 4.2 A 4.1 A
    12 1.0 0.5 15 60 A 4.0 A 3.8 A
    13 2.0 0 15 35 C 2.3 B 2.5 C 不定芽生长健壮,
    叶色浅绿
    14 2.0 0.01 15 42 B 2.8 B 3.4 B
    15 2.0 0.1 15 60 A 4.0 A 3.6 A
    16 2.0 0.5 15 47 B 3.1 B 3.4 B
    17 5.0 0 15 形成畸形的“芽状体”,无有效的不定芽
    18 5.0 0.01 15
    19 5.0 0.1 15
    20 5.0 0.5 15
    注:各列数值后的不同字母表示各处理间差异显著(SNK检验,P<0.01);下同。
    Note: Different capital letters represente extremely significant difference in the same rows (P<0.01, SNK test); the same as below.
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    表  2   6-BA不同质量浓度处理间不定芽诱导均数的两两比较(SNK法)

    Table  2   SNK multiple comparisons among the average number of adventitious bud induction under different mass concentrations of 6-BA treatments

    w(6-BA)/
    (mg·L−1)
    n 子集subset
    1 2 3
    水平1(0) 12 0.00
    水平2(0.5) 12 9.08
    水平3(1.0) 12 15.33
    水平4(2.0) 12 15.33
    Sig. 1.00 1.00 1.00
        注:6-BA质量浓度为5.0 mg/L时,由于无有效芽生成,故未进行统计分析。
        Note:When the concentration of 6-BA was 5.0 mg/L, no statistical analysis was executed because there was no effective bud formation.
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    表  3   NAA不同质量浓度处理间不定芽诱导均数的两两比较(SNK法)

    Table  3   SNK multiple comparisons among the average number of adventitious bud induction under different mass concentrations of NAA treatments

    w(NAA)/ (mg·L−1) n 子集subset
    1 2 3 4
    水平1(0) 12 6.92
    水平2(0.01) 12 8.33
    水平4(0.5) 12 11.67
    水平3(0.1) 12 12.83
    Sig. 1.00 1.00 1.00 1.00
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    表  4   不同质量浓度NAA对不定芽伸长的影响

    Table  4   Effects of different mass concentrations of NAA on the elongation of adventitious buds

    处理编号
    No
    w(NAA)/
    (mg·L−1)
    接种外植体数
    number of explants
    不定芽数
    number of buds
    平均芽长 / cm
    bud height
    玻璃化的不定芽数
    number of vitrified buds
    玻璃化率 / %
    ratio of vitrified buds
    21 0 30 55 C 2.8 C 3 C 5.5 C
    22 0.01 30 82 B 4.2 B 5 C 6.1 C
    23 0.05 30 137 A 5.5 A 17 B 12.4 B
    24 0.l 30 133 A 5.7 A 26 A 19.5 A
    25 0.5 30 124 A 3.2 C 15 B 12.1 B
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    表  5   不同IBA质量浓度对不定芽诱导生根的影响

    Table  5   Effects of different mass concentrations of IBA on the rooting of adventitious buds

    处理编号
    No
    w(IBA)/
    (mg·L−1)
    接种不定芽数
    number of buds
    生根不定芽数
    number of buds rooted
    生根率 / %
    ratio of rooted buds
    平均根数
    average root number
    平均根长 / cm
    average root length
    26 0 30 0 D 0.00 E 0.0 D 0 D
    27 0.5 30 10 C 33.33 D 1.2 C 0.9 C
    28 1.0 30 16 C 53.33 C 1.6 C 1.5 C
    29 2.0 30 20 B 66.67 C 2.7 B 2.7 A
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    表  6   不同基质对鸡蛋花组培苗移栽成活率的影响

    Table  6   Effects of different substrates on the survival rate of the transplanted plantlets in P. var. acutifolia

    处理编号
    No.
    基质成分及配比
    substratum composition
    and proportion
    移栽株数
    number of
    transplanted plantlets
    成活株数
    number of
    survived plantlets
    成活率
    survival ratio of
    plantlets
    生长状况
    growth state of
    plantlets
    33 V(珍珠岩):V(红壤)=1: 1 50 35 B 70.0 B 叶片舒展,植株健壮
    34 V(珍珠岩):V(草炭土)=1: 2 50 43 A 86.0 A 叶片舒展,植株健壮
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  • 期刊类型引用(1)

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    其他类型引用(1)

图(1)  /  表(6)
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出版历程
  • 通信作者:  吴涛 ynafwt@126.com
  • 收稿日期:  2017-06-03
  • 修回日期:  2017-09-25
  • 网络首发日期:  2018-02-28

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