云南农业大学学报(自然科学)
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云南农业大学学报(自然科学) 2016, Vol. 31 Issue (6) :1018-1021    DOI: 10.16211/j.issn.1004-390X(n).2016.06.008
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氯胺酮完全抗原的制备及免疫效果检测
段锐锐1, 高仕平1,2, 简宗辉1, 陈培富1
1. 云南农业大学 动物科学技术学院, 云南 昆明 650201;
2. 昆明科灵生物科技有限公司, 云南 昆明 650504
Preparation and Immune Response Detection of Ketamine-based Complete Antigen
DUAN Ruirui1, GAO Shiping1,2, JIAN Zonghui1, CHEN Peifu1
1. College of Animal Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China;
2. Kunming Keling Biological Technology Co., Ltd., Kunming 650504, China

摘要
参考文献
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摘要 

基于盐酸氯胺酮是一种化学反应性质活泼的小分子,利用半抗原-载体效应的免疫学原理,以三氯化磷(PCl3)为桥梁,将盐酸氯胺酮分子共价连接到兔血清白蛋白(RSA)分子,随后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析偶联物,并用该偶联物免疫BALB/c小鼠,最后采用斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)检测氯胺酮抗体应答水平。蛋白电泳分析显示已成功制备出分子量约为78.8 ku、氯胺酮与RSA的分子偶联比为39的完全抗原,能诱导实验小鼠产生效价为1:1 280的抗氯胺酮抗体。本试验不仅建立了检测氯胺酮的血清学方法,还为开发氯胺酮戒毒疫苗做了有益的积累。

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段锐锐
高仕平
简宗辉
陈培富
关键词盐酸氯胺酮   兔血清白蛋白   半抗原-载体效应   抗体应答     
Abstract

Based on the nature of ketamine hydrochloride being a kind of chemical reaction and lively small molecule,immunology principle of the effects of hapten-carrier was used. Phosphorus trichloride (PCl3) was used as a bridge connecting the ketamine hydrochloride covalent molecules to rabbit serum albumin molecules (RSA). Then, the sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was used to analyze the coupling and immune BALB/c mice. Finally, the dot enzyme-linked immunosorbent assay (dot ELISA) was applied to detect ketamine antibody response level. Protein electrophoresis analysis showed that ketamine and RSA molecular coupling ratio of 39 complete antigens was prepared successfully, its molecular weight is about 78.8 ku and the mice produced antibodies titer of 1 280 antibodies. The test not only established the serological method for detecting ketamine, also made beneficial effort to develop ketamine addiction vaccine.

Keywordsketamine hydrochloride   rabbit serum albumin   hapten-carrier effect   antibody response     
Received 2015-09-24;
Fund:

云南农业大学第七届学生科技创新创业行动基金项目(2013KFX001)。

Corresponding Authors: 陈培富(1973-),男,云南弥勒人,博士,副教授,主要从事动物微生物学与免疫学研究。E-mail:cltwins2003@163.com     Email: cltwins2003@163.com
About author: 段锐锐(1991-),女,云南普洱人,在读硕士研究生,主要从事动物微生物学与免疫学研究。E-mail:1282702245@qq.com;高仕平(1992-),女,云南楚雄人,本科,主要从事疾病模型研究。E-mail:1193080948@qq.com
引用本文:   
段锐锐, 高仕平, 简宗辉, 陈培富.氯胺酮完全抗原的制备及免疫效果检测[J]  云南农业大学学报(自然科学), 2016,V31(6): 1018-1021
DUAN Ruirui, GAO Shiping, JIAN Zonghui, CHEN Peifu.Preparation and Immune Response Detection of Ketamine-based Complete Antigen[J]  Journal of Yunnan Agricultural University, 2016,V31(6): 1018-1021
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